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4521.鲤多拷贝基因Apo-14kDa和ApoE的系统学分析和其在胚胎发育中的功能探索
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
本研究首次从鲤(Cyprinus carpio)中得到2种形式的14 kD载脂蛋白(Apo- 14kD)和4种形式的载脂蛋白E(ApoE),分别为Apo- 14kDa-a和Apo- 14kDa-b(同源性为79％)、ApoE-a1和ApoE-a2(同源性为91％)以及ApoE-bl和ApoE-b2(同源性为90％).系统学分析表明,Apo-14kDa-a与多数硬骨鱼的Apo - 14kDa同源性高于与Apo- 14kDa-b的同源性,而Apo-14kDa-b与草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的Apo- 14kDa同源性较高,提示二者在鲤科鱼类中的分化时间较早；ApoE-a和ApoE-b的分化时间也应该处于鲤科鱼类分化的早期阶段,随后进一步分化出4个同源基因.半定量RT-PCR结果显示Apo-14kDa-a基因在肝、头肾中大量表达,肠中微弱表达,其他组织无表达,Apo-14kDa-b基因只在肝表达；ApoE-al基因和ApoE-a2基因只在肠表达；而ApoE-b1基因和ApoE-b2基因均在脑、皮肤、鳃、肝、精巢、肠、心脏、肌肉、体肾、头肾中表达,但在脾和卵巢发生表达分化.进一步的qRT-PCR检测发现6个基因在不同胚胎发育时期的表达模式也有较大不同,且在不同时期的表达均存在阶段差异性.另外,qRT-PCR分析证实Apo-14kDa基因和ApoE基因均有可能在鲤胚胎发育过程中发挥着重要且显著不同的作用.
关键词：鲤；载脂蛋白；Apo-14kDa；ApoE；分子系统学；胚胎发育；基因功能
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4522.国内外工厂化循环水养殖研究进展
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
工厂化循环水养殖模式是一种新型的高效养殖模式，以养殖用水净化后循环利用为核心特征，节电、节水、节地，符合当前国家提出的循环经济、节能减排、转变经济增长方式的战略需求。本文以循环水养殖模式应用实践为主线，结合近几年养殖模式的科学研究和产业发展，围绕养殖管理与应用，分别对水循环系统对化学物质的承载力、水循环率、主要养殖种类、养殖效果和最适养殖密度等运营管理环节进行了总结和探讨，为今后建立适用于中国国情的工厂化循环水养殖模式管理标准提供参考。
关键词：循环水养殖;养殖模式;养殖管理;recirculating aquaculture;aquaculture mode;aquaculture management
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4523.不同精粗比日粮对泌乳奶山羊肝脏氨基酸代谢和产奶性能的影响
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
选择6只安装门静脉、肝静脉和股动脉慢性血管瘘的健康泌乳中期西农萨能奶山羊作为试验动物,采用2×2交叉试验设计,每组3只,试验日粮由精饲料和粗饲料组成,且精、粗饲料比例分别为4∶6(高粗料组,HF)和6∶4(高精料组,HC),研究不同精粗比日粮对泌乳中期奶山羊肝脏氨基酸代谢及乳产量、乳成分的影响.结果表明:门静脉血浆中高精料组异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、组氨酸、天冬氨酸、精氨酸、支链氨基酸(branched chain amino acid,BCAA)及总必需氨基酸(total essential amino acids,TEAA)浓度均高于高粗料组,且赖氨酸达到极显著水平(P＜0.01),而生糖氨基酸(glucogenicamino acid,GAA)和总氨基酸(total amino acid,TAA)浓度低于高粗料组,差异不显著(P＞0.05).肝静脉血浆中高精料组赖氨酸浓度显著高于高粗料组(P＜0.05),丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸的浓度显著低于高粗料组(P＜0.05),其他氨基酸浓度差异不显著(P＞0.05).股动脉血浆中高精料组赖氨酸浓度显著高于高粗料组(P＜0.05),其余氨基酸浓度无显著差异(P＞0.05),两种日粮对股动脉血浆中支链氨基酸、总必需氨基酸、生糖氨基酸及总氨基酸浓度的影响均不显著(P＞0.05).两种日粮对门静脉、肝静脉、股动脉血氨浓度无显著影响(P＞0.05)；高精料组门静脉、肝静脉、股动脉血浆中的尿素浓度显著高于高粗料组(P＜0.05)；高精料组的日产奶量、乳糖含量高于高粗料组,且乳糖含量差异达到显著水平(P＜0.05),乳蛋白率和乳脂率均低于高粗料组,差异不显著(P＞0.05).结论:不同精粗比日粮影响着肝脏内的氨基酸代谢,高精料日粮可显著提高血浆尿素水平.
关键词：日粮;精粗比;氨基酸;肝脏;奶山羊;diet;concentrate to forage ratio;amino acid;liver;dairy goats
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4524.西部地区文冠果种群种子特征及主要化学成分的地理变化
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
通过野外实际调查和测定,对我国西部地区8个文冠果大然群体的种子特征及主要化学成分进行研究.结果表明:8个文冠果种群的种子横径为1.05～1.51 cm,纵径为0.86 ～1.38 cm,种形指数为1.07 ～ 1.32,种群间存在显著差异；陕西延安种群种子的千粒质量和出仁率均最大,分别为1 108.4 g和48.28％,显著高于甘肃和青海种群；8个种群的种仁含油率均在53％以上,且不同种群间差异显著；文冠果种仁油含有12种脂肪酸,其中含量最高的是亚油酸(40.90％～46.12％),其次是油酸(29.21％ ～ 31.25％)；含有17种氨基酸(22.53％～ 27.58％),包括7种必需氨基酸,占总氨基酸的27.61％.相关分析结果表明:文冠果种形指数表现出明显的地理变化规律,随经度的增加,种形指数逐渐减小；种子千粒质量与4-9月份的降水量呈极显著正相关,与年平均温度呈显著正相关,与年干燥度呈显著负相关；种仁油含量随地理经度的减小而降低,与4-9月份的降水量呈显著正相关；种仁氨基酸含量与地理经度及无霜期相关性显著,随经度和无霜期的增加而增大,即东部地区氨基酸含量较高.
关键词：文冠果；种子特征；含油率；脂肪酸；氨基酸
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4525.鳜传染性脾肾坏死病毒ORF093基因的克隆、表达及其重组蛋白的免疫原性分析
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
从患传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and kidney necrosis virus, ISKNV)病的鳜体内获得 ORF093基因.采用 PCR 方法扩增 ISKNV ORF093基因全长,克隆入原核表达载体 pET32a(+), IPTG 诱导表达, Ni 柱纯化后,免疫新西兰大白兔制备兔抗重组093蛋白血清,免疫印记分析兔抗血清的特异性,中和实验和免疫保护实验分析重组093蛋白的免疫原性.结果显示: ISKNV 重组093蛋白可以在大肠杆菌中以包涵体形式存在;制备的兔抗血清可以特异性识别重组093蛋白,对 ISKNV 具有中和作用,可给鱼体提供至少10 d 的100%预防保护;重组093蛋白对ISKNV 的攻击具有保护作用,攻毒后15 d,093免疫组平均相对保护率为45.3%.结果说明重组093蛋白具有一定的免疫原性,可作为 ISKNV 候选疫苗抗原和治疗血清制备抗原.本研究通过中和实验及免疫保护实验对重组093蛋白的免疫原性进行分析,旨在为鳜 ISKNV 重组亚单位疫苗的研制奠定基础.
关键词：鳜;传染性脾肾坏死病毒;ORF093;免疫原性;Siniperca chuatsi;Infectious spleen and kidney necrosis virus (ISKNV);ORF093 protein;Immuno-genicity
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4526.凡纳滨对虾血蓝蛋白与人红细胞的作用靶位
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
采用亲和层析、SDS-PAGE、Far-Western-blotting、MALDI-TOF/MS等亲和蛋白质组学方法,发现凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血蓝蛋白可与人红细胞膜上一种分子量为27 kD的膜蛋白发生特异性结合,经Mascot搜索引擎检索该蛋白与人红细胞膜蛋白——硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase)具有高度同源性.继而运用生物信息学技术对其相互作用进行分析,结果显示,硫氧还蛋白过氧化物酶与血蓝蛋白在三维结构水平可发生特异性的对接,且其结合位点呈现“锁—钥模型”.由此推测,硫氧还蛋白过氧化物酶可能为对虾血蓝蛋白与人红细胞结合靶位之一,所获研究结果为进一步揭示血蓝蛋白的凝血、溶血作用机制等奠定了良好的基础.
关键词：凡纳滨对虾；血蓝蛋白；硫氧还蛋白过氧化物酶；作用靶位
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4527.川滇高山栎林土壤氮素和微生物量碳氮随海拔变化的特征
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
川滇高山栎林是川西亚高山地区地带性的灌丛群落,具有重要的生态水文功能.本文在川西巴郎山东南坡沿海拔梯度(2 551、3091、3 549 m),研究了川滇高山栎林表土层(0～15cm)和亚表土层(15～30 cm)的土壤微生物量碳氮、有机碳(TOC)和氮素含量的分布特征及其相互关系.结果表明:海拔3549m和3091m处两土层土壤TOC及其储量、总氮(TN)、水解氮含量无显著性差异,其含量均显著高于海拔2551 m处；海拔3091 m处表土层与亚表土层的铵态氮(NH4+ -N)含量显著比3549m的高,但与2 551 m处的NH4+-N含量差异不显著；在3个海拔梯度,土壤层硝态氮(NO3 --N)含量差异不显著；3个海拔梯度的总无机氮含量在表土层差异不显著,而亚表土层无机氮含量在海拔3091 m和3549 m处差异显著；表土层微生物量碳含量变化与有机碳含量变化特征一致,亚表土层土壤微生物量碳含量在3个海拔梯度差异显著；表土层土壤微生物量氮含量在海拔3091m处最高,但3个海拔梯度的差异不显著,亚表土层土壤微生物量氮含量随海拔梯度降低而减少,但差异不显著.相关分析表明:水解氮、TOC、TN和土壤微生物量氮含量之间极显著相关(P＜0.01)；土壤微生物量碳与水解氮、TOC和TN显著正相关(P＜0.05)；pH值与水解氮、TOC和土壤微生物量氮显著正相关；NH4+-N与pH值极显著负相关.
关键词：川滇高山栎林；海拔梯度；土壤氮素；土壤微生物量
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4528.盐度对中华绒螯蟹雌性亲蟹代谢的影响
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
测定了不同盐度(0,6,12,18,24)条件下,中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)雌性亲蟹的耗氧率、CO2排出率及NH3-N排泄率,并研究了其呼吸熵、氧氮比、代谢率及能源物质供能比随盐度的变化情况.结果表明,体质量为(55.59±6.24)g的中华绒螯蟹雌性亲蟹,在水温(16±1)℃条件下,盐度对其耗氧率及NH3-N排泄率影响显著(P＜0.05).在实验盐度范围内(0～24),其耗氧率及NH3-N排泄率均随盐度的升高而下降,CO2排出率及代谢率的变化趋势与耗氧率一致,且盐度为6的实验组亲蟹CO2排出率及代谢率均与对照组差异不显著(P＞0.05),在盐度12～24范围内,亲蟹CO2排出率及代谢率均显著低于对照组(P＜0.05)；呼吸熵及氧氮比均变化不显著(P＞0.05)；能源物质以脂肪的供能比例最大,其次是碳水化合物,蛋白质的供能比例最小.分析认为,中华绒螯蟹雌性亲蟹在生殖洄游过程中主要以脂肪作为供能物质,代谢率与能量消耗逐渐降低.
关键词：中华绒螯蟹；盐度；代谢；耗氧率；排氨率
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4529.葡萄谱系特有基因生物信息学识别、基因结构与表达特性分析
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
以葡萄全基因组29 971蛋白序列为查询序列,与包括葡萄在内的31个已测序植物蛋白序列、TIGR和NCBI数据库中的EST和非冗余蛋白质序列进行非同源性比对分析,保留E值大于0.01的序列,去除重复序列、转座子和注释不准确的基因序列,保留的非同源基因识别为葡萄谱系特有基因；并对谱系特有基因的结构和具有芯片表达信息的谱系特有基因的表达特性进行了分析.结果表明:共识别了2 009个葡萄谱系特有基因,与葡萄保守基因相比较,葡萄谱系特有基因平均外显子数量较少,为2个；平均外显子长度较短,为232 bp；平均内含子长度较长,为1 723bp,与拟南芥、水稻等谱系特有基因结构特点相似,谱系特有基因可能具有相似的起源和进化模式.在47个具有芯片表达信息和相应UniGene信息的基因中,Vv04 s0023 g01710、Vv00s0187g00160、Vv17 s0000 g09800、Vv14 s0083 g002 60分别在叶片、茎、细胞培养物、果实中相对表达量最高,相对表达量分别为2 120、2 282、5 566、1 428；有25个谱系特有基因仅在某一器官中表达,表明谱系特有基因具有器官特异性特点；分析34个谱系特有基因在4种非生物胁迫下基因表达情况,表明大部分基因表达受到明显抑制或不受诱导,推测非生物胁迫影响了这些谱系特有基因正常功能,也说明这些谱系特有基因较少参与非生物胁迫过程.
关键词：葡萄;谱系特有基因;生物信息学;基因表达;grapevine;lineage-specific gene;bioinformatics;gene expression
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4530.近江牡蛎HSC70基因对溶藻弧菌感染的反应
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
人工注射溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染近江牡蛎(Crassostrea hongkongensis),通过实时荧光定量RT-PCR方法检测了近江牡蛎6种不同组织器官(外套膜、鳃、消化腺、闭壳肌、心脏和血细胞)中HSC70基因表达量的变化;同时采用平板活菌计数法测定了近江牡蛎不同组织器官中溶藻弧菌菌量的变化.结果显示,人工注射感染溶藻弧菌后,近江牡蛎6种组织器官中HSC70基因表达量均显著性升高(P＜0.05),且随时间变化均呈现出先升高后恢复至对照水平的趋势；其中鳃组织中HSC70基因分别在第6小时和第72小时出现2次显著性高表达,且在第72小时的表达量高于第6小时(P＜0.05).在多数组织器官中,HSC70基因出现显著高表达后便急剧下降至对照水平,而在消化腺中高表达持续的时间长达18 h(第6-24小时).在注射感染溶藻弧菌后第6小时,血细胞中HSC70基因的表达量达到峰值,接近于对照水平的15倍；而在其他组织器官中,该基因表达峰值仅为对照水平的2.5倍左右.人工注射感染溶藻弧菌后3h,3种组织(消化腺、闭壳肌和血淋巴)中均能检测到溶藻弧菌的积累,其中闭壳肌中含菌量最高,6h时闭壳肌中含菌量急剧下降,随后又增加并维持在一定水平直至72 h；消化腺中菌量随着时间推移而增加,到达峰值后又逐步下降；血淋巴中,溶藻弧菌含量整体上随时间不断增加,到48 h稳定在较高水平.各组织中HSC70表达量与溶藻弧菌含量之间存在一定的关联性,尤其在溶藻弧菌攻击的靶器官(消化腺)中最为明显.由此可见,病原菌感染可以诱导近江牡蛎HSC70基因高表达,并且HSC70可能参与了机体抗病原菌感染的相关作用,这为进一步研究近江牡蛎HSC70基因在抗病免疫中的作用机制奠定了基础.
关键词：近江牡蛎；HSC70基因；溶藻弧菌；基因表达；实时荧光定量PCR
027-87841330