目的克隆人长链非编码RNA H19基因,构建表达载体,研究H19表达对MCF-7增殖的影响作用。方法制备乳腺癌MCF-7细胞总RNA,RT-PCR扩增长链非编码RNA H19全长序列,分子克隆至pc DNA3.1(-)真核表达载体;分别转染HEK-293T和COS 7细胞并行Real-time q PCR验证载体构建是否成功;转染H19表达载体入MCF-7细胞株,转染0、24和48 h后行MTS检测H19表达,同时设计siRNA小分子片段干扰H19的表达,观察对MCF-7细胞增殖活性的影响。结果成功克隆和构建了h H19-pc DNA3.1(-)表达载体;转染入MCF-7细胞48h后,H19过...

关键词：长链非编码RNA；H19基因；基因克隆；瞬时转染；HEK-293T细胞；COS-7细胞；MCF-7细胞

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针对上升流引起的微弱信号在A/D转换前容易被传感器系统噪声所淹没的问题,将滤波、放大和A/D转换电路采用集成芯片AD7195处理,减少分立器件噪声,AD7195芯片内部集成差分放大器、交流激励和数字滤波器,同时具有24位高精度A/D转换功能。通过搭建实验装置,采集数据和分析,测试了系统准确度。实验结果表明:该系统能够识别输入信号的误差为±0.4μV,满足设计要求。

关键词：海流传感器；AD7195；微弱信号

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简单介绍了2014年国际大电网委员会(CIGRE)信息系统和通信技术专委会(SC D2)的会议情况,重点描述了信息通信技术在分布式能源(DER)中的应用、新形势下生产运行管理系统的可靠性和电力系统通信网及业务管理发展3个优先课题所研究的技术内容及相关论文,并对信息系统与通信技术的发展趋势及应重点关注的技术问题进行了分析。

关键词：国际大电网会议；信息系统；通信；信息安全

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以玉米转酮醇酶(1ITZ)的晶体结构为模板，对拟南芥转酮醇酶(At TKL1)的三维结构进行模拟和优化。利用生物信息学方法,确定其氨基酸结合位点为His143,Gly234,Asn263,Arg434,Ser461,Gln488,Phe515,His539,Asp547和Arg598，催化氨基酸位点为His103和His340.通过分子模拟确定α-三联噻吩与At TKL1的活性口袋可有效结合，且At TKL1的催化位点和结合位点为其与α-三联噻吩结合的键位点。利用荧光猝灭光谱技术确定At TKL1与α-三联噻吩之间存在结合作用；酶活力检测结果表明加入α-三联噻吩后转酮醇酶蛋白的活性降低，进一步验证了At TKL1与α-三联噻吩之间的相互作用。

关键词：转酮醇酶；α-三联噻吩；同源建模；分子对接

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为全面了解绿豆皮、红小豆皮和黑豆皮的18 种元素含量，充分开发利用豆皮资源，提高豆类加工产品的附加值，用元素分析仪（elemental analyzer，EA）和电感耦合等离子体发射光谱仪（inductively coupled plasma-atomic emission spectrometer，ICP-AES）测定了三种豆皮的N、C、S、Ca、Mg、K、P、Na、B、Ba、Co、Cr、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn 和Sr 元素含量。结果表明，元素分析仪测定豆皮中N、C 和S 方法检出限为32~96 μg/g，回收率为97% ~115 %，相对标准偏差为0.20%~2.63 %（n=5）；ICP-AES 测定豆皮中Ca、Mg、K、P、Na、B、Ba、Co、Cr、Cu、Fe、Mn、Ni、Zn 和Sr 方法检出限为0.02~152 μg/g，回收率为84% ~118 %，相对标准偏差为0.44%~4.46 %（n=5）。黄豆标准物N、Mg、P、B、Ba、Co、Cr、Mn、Ni、Zn 和Sr 元素测定值在推荐范围内，S、Ca、K、Na、Cu 和Fe 元素测定值接近推荐值。分析方法快速、简便，分析方法达到了应用的要求。

关键词：绿豆皮；红小豆皮；黑豆皮；元素分析仪（EA）；电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-AES)

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位于四川盆地西北部的九龙山构造属于多产层超高压气藏,地质条件复杂,深井钻进过程中,三叠系雷口坡组—嘉陵江组地层缩径卡钻、嘉二段盐水侵、飞仙关组—吴家坪组漏喷同存等故障频发,严重影响了深部井段的钻井安全、加长了钻井周期。为此,通过总结九龙山构造深井钻井施工的特点与难点,以及已钻井常规井身结构不足的原因,结合建立的地层三压力剖面上存在的必封点位置,进而提出了一套深井非常规井身结构优化设计方案,即在深部井段提供3层套管层次,以满足分隔深部窄密度窗口井段地层的要求且可灵活调整,同时下部井段的固井环空间隙能够保证注水泥的基本要求。该设计方案在龙004-X1井实践获得成功,平均机械钻速达到了1.89m/h,钻井周期缩短至418d,同比邻井事故复杂损失时间降低了2589h,满足了该区深井安全快速钻井的需要,为该区开发二叠系超高压气藏积累了宝贵的经验。

关键词：四川盆地；西北部；九龙山构造；深井；超高压；非常规

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为探索EGCG 对Nicotine 诱导肺癌细胞增殖的抑制作用，本研究通过MTT 实验筛选出EGCG、Nicotine对肺腺癌细胞H1299 的最佳作用浓度，利用实时荧光定量PCR 技术检测EGCG、Nicotine 对H1299 细胞中Bax、Bcl-2、Jak2 和Stat3 基因mRNA 相对表达量的变化。实验结果表明，EGCG 对H1299 细胞的半抑制浓度IC50 值约为32 μmol·L-1（24 h）、15 μmol·L-1（48 h）；1 μmol·L-1 的Nicotine 对H1299 细胞促增殖作用明显；以15 μmol·L-1 的EGCG 预处理H1299 细胞24 h 可显著下调1 μmol·L-1 Nicotine 的促增殖作用（P<0.05）。1μmol·L-1 的Nicotine 处理H1299 细胞可明显降低JAK2/STAT3 信号通路中Bax 基因mRNA 的表达，增加Bcl-2、Jak2、Stat3 基因的mRNA 表达；15 μmol·L-1 EGCG 预处理H1299 细胞可反向调控Nicotine 诱导所致JAK2/STAT3 信号通路中Jak2、Stat3 和Bax、Bcl-2 基因表达量的变化，结果具有显著性差异（P<0.05）。由此可知，EGCG 对Nicotine 诱导的肺腺癌H1299 细胞增殖及JAK2/STAT3 信号通路中促增殖基因mRNA 的表达起抑制作用。

关键词：EGCG；Nicotine；H1299 细胞；JAK2/STAT3 mRNA 表达

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介绍了制罐对３１０４铝合金扁锭的基本要求，分析了电解铝液的基本特点及其对罐用３１０４铝合金扁锭质量的影响，研究了用电解铝液生产高品质３１０４铝合金扁锭的关键技术。

关键词：电解铝液；制罐；３１０４铝合金扁锭；高品质；关键技术

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【目的】硫转运蛋白(sulfate transporter,SULTR)参与根系对外界环境中硫酸根(SO42-)的吸收与转运。大豆硫转运蛋白基因GmSULTR1;2b在根中特异表达,其功能是将外界的SO42-吸收转运到植物根系中。文章克隆大豆硫转运蛋白GmSULTR1;2b的启动子,研究该启动子的驱动活性和组织表达情况,从而了解GmSULTR1;2b的调控机制,为提高大豆含硫氨基酸含量提供分子依据。【方法】根据NCBI中GmSULTR1;2b的序列,分析预测该基因上游2 259 bp为启动子,并利用在线数据库PLACE和Plant-CARE预测该启动子序列的调控元件。以大豆品种南农N2899的DNA为模板,进行普通PCR扩增,将克隆的启动子序列与GUS连接构建植物重组表达载体pSULTR1;2b∷GUS。利用冻融法将重组质粒转入农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导的遗传转化法转化大豆进行瞬时表达,以GUS为报告基因对启动子的活性进行分析。另外,将重组质粒转入发根农杆菌K599中进行大豆毛状根转化试验,借助于GUS报告基因,通过体视镜观察毛状根的横切面,分析启动子在根中的表达情况。最后以转化的阳性毛状根为材料,通过GUS酶活试验(GUS activity)分析启动子的活性。【结果】克隆大豆品种南农N2899的GmSULTR1;2b启动子与NCBI序列基本一致。通过在线预测分析启动子的调控元件发现该启动子具有真核生物启动子必须的核心元件TATA-box外,还含有激素应答元件ERE(乙烯响应元件)、ABRE(脱落酸响应元件)等,胁迫应答元件TC-rich repeats(干旱胁迫以及病虫害胁迫)、AT-rich element(AT-rich的DNA与蛋白结合位点)和MYB等。重组载体pSULTR1;2b∷GUS经PCR和测序鉴定,证实已构建成功。大豆瞬时表达后进行X-gluc染色显示,重组载体侵染的大豆显蓝色,说明GmSULTR1;2b启动子能够驱动下游GUS的表达。对转化的毛状根染色之后,体视镜下观察阳性根的横切面,发现GUS主要在根毛、根表皮和中柱内表达,表明GmSULTR1;2b启动子主要在根毛、根表皮和中柱内表达。对转化毛状根进行GUS酶活试验(GUS activity)说明该启动子的启动活性比CaMV35S启动子的启动活性弱。【结论】克隆了GmSULTR1;2b启动子序列,该启动子具有驱动下游GUS的表达的功能,而且该启动子在根毛、根表皮和中柱内表达。

关键词：大豆；GmSULTR1；2b；启动子；瞬时表达；GUS活性

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目的建立电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)法并测定丁酸氯维地平脂肪乳注射液的包装材料向注射液中12种元素的迁移量。方法碳化-氧化法消解,采用内标法,建立ICP-MS方法测定丁酸氯维地平脂肪乳注射液中12种元素的迁移量。结果各元素线性关系良好(r>0.9995),方法准确度、精确度和稳定性均达到要求。加标回收率分别在81.3%~119.0%之间。结论所选择的包装材料与丁酸氯维地平脂肪乳注射液具有较好的相容性,其向注射液中迁移的元素有Na、K、Sb和Ba,迁移量符合要求。

关键词：丁酸氯维地平脂肪乳注射液；包装材料；电感耦合等离子体质谱法；迁移量

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