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4841.环丙烯类乙烯效应抑制剂二次处理对番茄乙烯生成及其基因表达的影响
[食品制造业] [2014-05-15]
为研究不同支链长度的3种环丙烯类乙烯效应抑制剂二次处理对番茄采后乙烯生物合成及乙烯生物合成关键基因表达的影响,分别采用0.75μL/L 1-MCP(1-Methylcyclopropene,1-甲基环丙烯),2μL/L1-PentCP(1-pentylcclopropene,1-戊基环丙烯)和0.5μL/L 1-OCP(1-octylcyclopropene,1-辛基环丙烯)处理番茄,以不处理为对照,并于贮藏第8天进行了二次处理,对处理后番茄果实常温货架期间的乙烯生物合成及其基因表达情况进行了研究.结果表明:3种乙烯效应抑制剂处理均能不同程度地抑制番茄果实采后贮藏过程中的呼吸强度和乙烯释放量,同时抑制了ACS2和AC01基因的表达量,上述效果又随支链长度的延长而呈现减弱的趋势；3种处理均较好地保持了番茄果实贮藏期间的品质,二次处理对果实贮藏特性影响不大.
关键词：番茄;1-甲基环丙烯;结构相似物;乙烯;基因表达
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4842.五氯酚对稀有鮈鲫胚胎毒性效应研究
[水利、环境和公共设施管理业] [2014-05-15]
研究五氯酚(PCP)对稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)胚胎的致畸和毒性效应.以7.5,30,60,120,250μg/L5个浓度的PCP对0hpf(hpf,受精卵孵出时间)的稀有鮈鲫胚胎进行暴露染毒,同时设置空白对照组、二甲基亚砜溶剂对照组和雌二醇(EE2,2.5ng/L)阳性对照组.在立体显微镜下观察整个胚胎的发育过程,统计胚胎的孵化率、96hpf相对存活率和各时期的畸形率,并利用半定量RT-PCR检测胚胎中CYP1A基因和p53基因mRNA的表达.结果表明,PCP暴露能延迟稀有鮈鲫胚胎发育,并造成胚胎卵凝结、心包囊肿、脊柱弯曲等多种畸形甚至死亡.随着PCP暴露浓度的升高,稀有鮈鲫胚胎的孵化率和96hpf相对存活率降低,各时期的畸形率增加,并呈现一定的浓度效应.稀有鮈鲫胚胎CYP1A基因和p53基因mRNA表达被显著诱导,并随PCP浓度的升高而增加.PCP对稀有鮈鲫胚胎发育表现为显著的毒性效应.稀有鮈鲫胚胎孵化率、96hpf相对存活率、各时期畸形率及CYP1A基因和p53基因的诱导表达可以作为评价PCP毒性作用的敏感指标.
关键词：稀有鮈鲫；胚胎发育；五氯酚；毒性效应；CYP1A；p53
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4843.3-氯-1,2-丙二醇对睾丸间质瘤细胞R2C生物活性的影响
[食品制造业] [2014-05-15]
为了探讨3-氯-1,2-丙二醇(3-Monochloropropane-1,2-diol,3-MCPD)对体外培养的大鼠睾丸间质瘤细胞R2C活性的影响,分别用0.5、1、2、4、6 mmol/L的3-MCPD刺激R2C细胞,利用MTT法得到3-MCPD对R2C细胞的IC25、IC50以及IC75.取以上3种不同浓度的3-MCPD作用细胞4h和24 h,通过单细胞凝胶电泳法(Single Cell Gel Electrophoresis,SCGE)检测其作用4h时对DNA损伤的程度;采用放射免疫法(Radio immunoassay,RIA)检测其作用4h和24 h对孕酮合成的影响.结果显示:实验组与对照组相比,3-MCPD能抑制R2C细胞的增殖,其IC25、IC50和IC75分别为1.027、1.802、3.160 mmol/L;浓度为IC75的3-MCPD作用R2C细胞4h后,对其DNA有损伤作用,且孕酮的合成量降低了16.0％;当3-MCPD各浓度组作用R2C细胞24 h后,与对照组相比孕酮合成量降低9.5％至61.2％.以上结果表明,3-MCPD能抑制R2C的活性,影响细胞孕酮的合成.
关键词：3-氯-1,2-丙二醇;睾丸间质瘤细胞;孕酮;3-Monochloropropane-1,2-diol;leydig tumor cells;progesterone
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4844.知母总皂苷对Aβ1-42引起的老年大鼠学习记忆能力及海马炎症反应的影响
[医药制造业] [2014-05-15]
目的 观察知母总皂苷(SAaB)对淀粉样β蛋白片段1-42( Aβ1-42)引起的老年大鼠学习记忆能力改善作用及其对海马炎症反应的影响.方法 脑室注射A1β1-42后第2天进行Morris水迷宫训练,连续训练5d,在第6天进行空间探索实验,训练期间继续给药,记录逃避潜伏期及各象限游泳时间;Nissl染色观察海马CA1区锥体神经元改变及免疫组织化学染色观察胶原纤维酸性蛋白(GFAP)改变;Western blot检测GFAP表达水平改变.结果 Aβ1-42组大鼠出现明显的空间学习障碍,表现为逃避潜伏期较对照组明显延长,在原平台象限游泳时间占总游泳时间的百分比明显降低;海马CA1区锥体神经元的排列较对照组不整齐且稀疏;GFAP阳性细胞数明显增多,染色增强,突起增多并延长.GFAP蛋白表达明显增加.SAaB可明显抑制Aβ1-42引起的这些变化,呈明显剂量依赖性.结论 SAaB能够明显的改善Aβ1-42引起的老年大鼠学习记忆能力障碍及海马神经元损伤.
关键词：知母总皂苷；淀粉样-β蛋白；学习记忆；炎症
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4845.人血管内皮细胞生长因子受体1酪氨酸激酶的克隆与表达
[医药制造业] [2014-05-15]
目的 克隆人血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体1酪氨酸激酶(VEGFR1/Flt-1)基因,构建其表达载体,为其应用研究奠定基础.方法 应用RT-PCR技术,对可溶性血管内皮细胞生长因子受体1(sVEGFR1/sFlt-1)胞外区前四个结构域基因片段进行扩增,亚克隆至pUC18质粒,进行测序后,建立其表达载体,获得重组质粒pSGL-gpp-F,并将其转化至Streptomyces lividans TK24,获得基因工程菌株pSGLgpp-F,对其培养上清液进行SDS-PAGF及Western blot分析.结果 在信号肽gPP的引导下,sFlt-1在S.lividans中获得成功分泌表达,且表达的sFlt-1具有和配基VEGF结合的生物学活性,但在信号肽vis的控制下,未获成功表达.结论 sFlt-1经分离提纯后,可用于与抑制血管生成相关的疾病的研究,而利用重组sFlt-1建立VEGF拮抗剂筛选模型,对于从组合化学库等天然来源的化合物中,提取高通量、大规模药物的筛选提供了可能.
关键词：血管内皮生长因子受体；基因表达；酪氨酸激酶；克隆
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4846.乳糖诱导胸腺融合肽Tα1-TP5在大肠杆菌中的表达
[医药制造业] [2014-05-15]
目的 研究用乳糖替代异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂诱导胸腺融合肽Tα1-TP5表达,并优化诱导表达条件.方法 在摇瓶发酵条件下,以乳糖作为诱导剂,SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导剂浓度、诱导时机、诱导时间、诱导温度和诱导方式等条件对目的肽Tα1 -TP5表达量的影响,并与IPTG诱导结果相比较.结果 选用TB培养基,在菌体对数生长的中后期加入终浓度为1 g/L的乳糖,37℃诱导6h,GST-Tα1 -TP5融合蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35％,且主要以可溶形式表达,与IPTG的诱导结果相同.分批流加乳糖4次和一次性加入乳糖诱导,融合蛋白表达量无明显差异.结论 乳糖可以替代IPTG诱导胸腺融合肽Tα1-TP5的表达.
关键词：胸腺融合肽Tα1-TP5；乳糖；IPTG；表达；诱导
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4847.建鲤生长激素促泌素受体1基因的特性及其与增重相关SNP位点的筛选
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
GHS-R基因在哺乳类为候选的肥胖和生长数量性状位点.本实验使用RT-PCR及PCR的方法,从建鲤Cyprinus carpio var.jian)分离到2个jlGHS-R1s,称为jlGHS-R1a和jlGHS-R1b(分别简称1a和1b). jlGHS-R1s的阅读框编码360个氨基酸,两者间相似性高达96％；另外还存在2个jlGHS-R1s的转录变体(分别简称1a'和1b’),选择性切割了翻译起始碱基后第490-680 nt的191bp片段,该片段两端碱基分别为gt-ag,这种选择性切割导致翻译提前终止,仅翻译184个氨基酸,包括前面3个半跨膜区,这与已报道的罗非鱼等的保留内含子的转录变体不同.jlGHS-R1s的阅读框被1个内含子分隔,该内含子位于第260个氨基酸密码子的第1和第2个碱基之间,1a和1b的内含子长度分别为676bp和885 bp.使用分段PCR在建鲤群体的1a和1b基因上共找到32个SNP位点,构建PCR-RFLP法对其中9个SNPs进行基因型检测,结果发现各种基因型在322尾建鲤中均有出现,但存在着明显的偏分布.与增重的相关分析表明,位点1a-I_ C386T和1b-E1_ G159T与雌雄鱼鱼种和成鱼阶段增重分别呈极显著(P＜0.01)和显著(P＜0.05)相关,CC型和GG型个体增重最快,另外有5个位点则与其中的某阶段或者某性别的增重相关,为了确定上述所得标记的适用性,选取其中4个标记在另外7个家系共610尾鱼中检测,结果C386T和G159T还是与增重呈极显著(P＜0.01)和显著(P＜0.05)相关,可用于建鲤分子育种.
关键词：建鲤；生长激素促泌素受体；单核苷酸多态位点；生长相关分子标记
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4848.重组人转化生长因子β1原核表达及多克隆抗体制备
[医药制造业] [2014-05-15]
目的 克隆人转化生长因子β1( TGF-β1)基因,原核表达TGF-β1蛋白,制备兔抗人TGF-β1多克隆抗体.方法 应用RT-PCR技术扩增人TGF-β1基因序列,构建pET-28a-TGF-β1重组质粒.转化至E.coli BL21( DE3)中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达.Western-blot检测目的蛋白的抗原性.免疫新西兰白兔,获得兔抗人TGF-β1多克隆抗血清.饱和硫酸铵盐析法纯化多克隆抗体,间接ELISA法检测多克隆抗体效价,Westernblot技术进行抗体特异性检测.结果 获得了TGF-β1编码序列和表达载体,目的蛋白主要存在于超声破碎后的包涵体中;经Western-blot检测目的蛋白存在抗原性;获得纯化的兔抗人多克隆抗体效价达1:10 000.结论 获得的兔抗人TGF-β1多克隆抗体效价较高,具有良好的特异性.
关键词：转化生长因子β1；抗纤维化；原核表达；多克隆抗体
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4849.海水鱼类网箱养殖水域沉积物有机质的来源甄别
[农、林、牧、渔业] [2014-05-15]
利用稳定碳氮同位素示踪技术,对南沙港网箱养殖水域沉积物中有机质的来源进行了分析研究.结果表明,网箱养殖区(距离网箱边缘100 m范围内)及对照区(距离网箱边缘大于500 m)沉积物的δ13C值分别为(-17.72±1.2)‰和(-12.73±0.38)‰,δ15N分别为(6.44±0.2)‰和(5.61±0.2)‰.网箱养殖区沉积物的有机质来源主要为残饵和鱼类粪便,比例分别占47.70％和27.71％.随着与养殖网箱距离的增加,网箱养殖源有机质(残饵和鱼类粪便之和)的比例降低,变化趋势符合指数方程y=97.167e-0.0074x(R2=0.848 1),在潮流驱动的沉积物再悬浮及野生鱼类的扰动影响下,网箱养殖源有机质的水平位移可达400 m.鱼类网箱养殖的养殖废物是南沙港水域沉积物有机污染的主要来源.
关键词：鱼类网箱养殖；沉积物；δ13C；δ15N
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4850.胸腺肽α1联合短程化疗治疗肺结核伴糖尿病患者的效果观察
[医药制造业] [2014-05-15]
目的 观察胸腺肽α1联合短程化疗治疗肺结核伴糖尿病的效果.方法 97例初治肺结核伴糖尿病患者随机分为2组,观察组予注射用胸腺肽α1 1.6 mg,皮下注射,2次/周,两组均予短程化疗方案并用胰岛素有效控制血糖.测定治疗前及治疗3个月后外周血T淋巴细胞亚群:CD4+细胞、CD8+细胞；并于治疗前及治疗3个月后作胸部CT检查.结果 观察组治疗3个月后CD4+细胞回升,CD8+细胞下降,CD4 +/CD8+回升,胸部病灶治疗有效率与对照组比较有明显差异.结论 胸腺肽α1联合短程化疗对肺结核伴糖尿病患者有明显的疗效.
关键词：胸腺肽α1；肺结核；糖尿病
027-87841330