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乳糖诱导胸腺融合肽Tα1-TP5在大肠杆菌中的表达
作者:谢琦;李娟;王凤山 作者单位:桂林医学院生物技术学院,广西桂林541004;山东大学药学院生化与生物技术药物研究所,山东济南250012;山东大学药学院生化与生物技术药物研究所,山东济南250012 加工时间:2014-05-15 信息来源:《中国生化药物杂志》
关键词:胸腺融合肽Tα1-TP5;乳糖;IPTG;表达;诱导
摘 要:目的 研究用乳糖替代异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂诱导胸腺融合肽Tα1-TP5表达,并优化诱导表达条件.方法 在摇瓶发酵条件下,以乳糖作为诱导剂,SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导剂浓度、诱导时机、诱导时间、诱导温度和诱导方式等条件对目的肽Tα1 -TP5表达量的影响,并与IPTG诱导结果相比较.结果 选用TB培养基,在菌体对数生长的中后期加入终浓度为1 g/L的乳糖,37℃诱导6h,GST-Tα1 -TP5融合蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,且主要以可溶形式表达,与IPTG的诱导结果相同.分批流加乳糖4次和一次性加入乳糖诱导,融合蛋白表达量无明显差异.结论 乳糖可以替代IPTG诱导胸腺融合肽Tα1-TP5的表达.
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