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4121.白细胞介素1β影响人血管平滑肌细胞对美伐他汀的敏感性
[医药制造业] [2014-10-11]
目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)能否干扰人血管平滑肌细胞对美伐他汀的敏感性。方法给予不同浓度美伐他汀(0,1,10,20,50μmol·L-1)单独或联合20μg·L-1IL-1β处理人血管平滑肌细胞24 h,酶法测定细胞内羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCoA-R)的酶活性,并用荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测HMGCoA-R的mRNA表达水平。然后选取50μmol·L-1美伐他汀单独或联合20μg·L-1IL-1β处理人血管平滑肌细胞24 h,western blot检测相关基因的蛋白表达。结果美伐他汀呈剂量依赖性抑制人血管平滑肌细胞HMGCoA-R的活性。I...
关键词:白细胞介素1β;美伐他汀;血管平滑肌细胞
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4122.广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶对血小板聚集、释放及超微结构的影响
[医药制造业] [2014-10-11]
目的研究广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)对人体外血小板聚集、释放及超微结构的影响。方法比浊法测定广西眼镜蛇毒LAAO对二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起的血小板聚集率的影响,双抗夹心放免法测定GMP-140含量,并观察血小板超微结构。结果广西眼镜蛇毒LAAO剂量能明显抑制二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起的血小板聚集,并呈明显的正相关;明显降低凝血酶诱导的血浆GMP-140水平,减轻血小板超微结构的损伤程度。结论广西眼镜蛇毒LAAO能明显抑制二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引...
关键词:蛇毒;L一氨基酸氧化酶;血小板聚集;GMP-140;超微结构
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4123.P2Y1、P2Y12和ITGB3基因多态性对PCI术后氯吡格雷抗血小板效应的影响
[医药制造业] [2014-10-11]
目的:观察P2Y1、P2Y12和ITGB3基因多态性对经皮冠状动脉介入(PCI)术后氯吡格雷抗血小板效应的影响。方法:520例冠心病患者行PCI术前给予硫酸氢氯吡格雷负荷剂量300 mg/d,口服+阿司匹林负荷剂量100 mg/d,口服;术后给予硫酸氢氯吡格雷维持剂量75 mg/d,口服,服用6个月以上+阿司匹林维持剂量100 mg/d,口服,服用1年,如患者出现胃出血等不宜服用时停止用药。观察患者一般资料、基因分型、P2Y1单体型与主要不良心血管事件(MACE)、出血事件的关联性。结果:520例患者中约82%为男性,40%为吸烟者;老年、合并高血压或合并糖尿病时MACE发生风险相对较高,风险...
关键词:基因多态性;氯吡格雷;主要不良心血管事件;出血事件
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4124.慢病毒介导shRNA干扰前列腺癌PC3细胞Keap1基因表达的研究
[医药制造业] [2014-10-11]
目的:针对Keap1构建shRNA慢病毒干扰载体,并评价慢病毒介导的RNA干扰在人前列腺癌细胞PC3中的基因沉默效应。方法:利用生物信息学方法设计针对Keap1的RNAi寡聚核苷酸序列;采用慢病毒载体构建Keap1的shRNA载体,利用大肠杆菌进行重组表达,利用293T细胞包装得到重组腺病毒;依据绿色荧光蛋白(GFP)示踪,逐孔稀释法确定转染效率及滴度;以实时荧光定量法比较各靶序列的基因干扰效果。结果:筛选了所构建的4个Keap1靶向序列,以慢病毒载体构建完成对应Keap1的shRNA质粒。通过瞬时转染筛选得到效率最佳(干扰效率达到80%)的靶序列和工作条件。结论:本研究成功构建并筛选了针对K...
关键词:Keap1;shRNA;慢病毒;PC3细胞
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4125.沉默Bmi-1基因表达对人小细胞肺癌细胞H1963增殖与侵袭的抑制作用
[医药制造业] [2014-10-11]
目的:探讨沉默Bmi-1基因对人小细胞肺癌细胞H1963增殖与侵袭的抑制作用。方法:用小分子干扰RNA(siRNA)沉默Bmi-1基因,以100 nmol/L特异性Bmi-1的siRNA转染H1963细胞为试验组,以未转染细胞为空白对照组,以转染阴性序列Neg-siRNA细胞为阴性对照组。采用蛋白质印迹法检测siRNA对Bmi-1的基因沉默效果;经MTT法、流式细胞术、Transwell侵袭试验分别检测各组细胞的增殖活性、周期分布及侵袭能力,再用蛋白质印迹法检测各组细胞中抑癌基因P16、P14和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimen...
关键词:Bmi-1基因;小分子干扰RNA;人小细胞肺癌细胞H1963;侵袭;增殖
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4126.川楝子中柠檬苦素类成分的HPLC-ELSD指纹谱分析
[医药制造业] [2014-10-11]
目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射方法,分析川楝子中柠檬苦素类成分的指纹谱,并测定1-去乙酰基尼泊里宁B的含量。方法:采用YMC-Pack C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以流动相甲醇-水-四氢呋喃(55∶40∶5)进行洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃;采用蒸发光散射检测器,漂移管温度93.0℃,载气流速2.3 L·min-1。结果:川楝子中主要含有1-去乙酰基尼泊里宁B(1)、尼泊里宁B(2)、尼泊里宁A(3)、1-顺芷酰基尼泊里宁A(4)、川楝素(5)等柠檬苦素类成分,化合物2~5存在不同程度互变异构现象;1-去乙酰基尼泊里宁B的线性范围为2.324~19...
关键词:川楝子;柠檬苦素;1-去乙酰基尼泊里宁B;尼泊里宁;川楝素;互变异构体;指纹谱;高效液相色谱法;蒸发光散射检测
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4127.FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用及其机制
[医药制造业] [2014-09-12]
本研究旨在阐明FGF-21与胰岛素在调节糖代谢过程中的协同作用机制。通过检测FGF-21或(和)胰岛素作用后,HepG2胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖的吸收率以及2型糖尿病db/db小鼠血糖变化,证明FGF-21和胰岛素具有协同作用;采用real-time PCR方法检测肝脏中GLUT1和GLUT4转录水平,揭示两者在调节糖代谢过程中协同作用的机制。实验结果表明,两者在调节糖代谢过程中具有协同作用。Real-time PCR结果表明,FGF-21单独作用可上调GLUT1转录水平,且呈剂量依赖性,而对GLUT4转录水平没有作用;胰岛素(4 u)单独作用组仅上调GLUT4转录水平,而对GLUT1转录水平...
关键词:糖尿病;FGF-21;胰岛素;协同作用
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4128.SPE-HPLC法测定马破伤风免疫球蛋白F(ab')_2中TritonX-100残留量
[医药制造业] [2014-09-12]
目的:建立固相萃取高效液相色谱(SPE-HPLC)法测定马破伤风免疫球蛋白F(ab')2中灭活剂Triton X-100的残留量。方法:采用Oasis固相萃取小柱对样品进行预处理,以水和5%甲醇为淋洗剂,以甲醇为洗脱剂,收集甲醇洗脱物用于HPLC分析。采用ZORBAX Extend-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20),流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果:Triton X-100浓度在0.56~55.34μg·mL-1范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9998);检测限(S/N=3)为2.03 ...
关键词:马破伤风免疫球蛋白F(ab')2;Triton X-100;灭活剂;裂解剂;辛基苯氧基聚2-乙氧基乙醇;杂质残留检测;固相萃取;高效液相色谱法
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4129.调节性树突状细胞的获取途径及其诱导免疫耐受的临床应用
[医药制造业] [2014-09-12]
树突状细胞(DCs)是体内作用最强的抗原提呈细胞,具有双向免疫调节功能,既可诱导免疫应答,又可诱导免疫耐受。调节性树突状细胞(DCreg)具有负向免疫调节功能,可降低T细胞的免疫活性,诱导免疫耐受。DCreg可通过不同机制经药物、细胞因子、局部微环境产生,其诱导的免疫耐受作用在器官移植、自身免疫性疾病中具有重要的临床意义。近期,DCreg的耐受性和安全性已在1型糖尿病和类风湿关节炎的临床试验中得到证实。本文就DCreg的获取途径及其诱导免疫耐受的临床应用综述如下。
关键词:树突细胞;免疫耐受;器官移植;糖尿病,1型;关节炎,类风湿;T淋巴细胞;调节性树突状细胞
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4130.哮喘患者经糖皮质激素治疗前后血清介素水平变化及意义
[医药制造业] [2014-09-12]
目的探讨支气管哮喘发病机制中白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)及白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)的作用。方法选择2011年3月~2012年1月收治于武汉市第三医院的支气管哮喘急性发作期患者40例作为激素组,同期体检健康者30例作为对照组。测定对照组与激素组治疗前后血清中IL-18、IL-33水平,1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)与用力肺活量(forced vital capacity,FVC)的比值FEV_1%,检测嗜酸粒细胞(eosinophil cell,EOS)...
关键词:哮喘;糖皮质激素;白细胞介素-18;白细胞介素-33