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451.烟草及其制品中砷的形态分析
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了测定烟草中砷(As)的形态,采用超声溶剂萃取、高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用技术建立了亚砷酸[As(Ⅲ)]、砷酸[As(V)]、二甲基肿酸(DMA)、甲基胂酸(MMA)、砷甜菜碱(AsB)和砷胆碱(AsC)6种形态As的分离分析方法.结果表明:采用Hamilton PRPX-100(250 mm×4.1 mm,10 μm)阴离子交换柱、15 mmol/L (NH4)2HPO4(pH6.0)等度洗脱,6种不同形态As在15 min内实现了基线分离,线性范围不小于两个数量级,检出限0.44～0.98 μg/L,加标回收率85.19％～87.31％,相对标准偏差(RSDs,n--5) 2.45％～3.56％.烟草中As含量较低,且部分以低毒的DMA、MMA形态存在；超声溶剂提取能同时提取烟草中的有机As和无机As,较客观地反映样品中As的形态分布.该方法准确、可靠,适合于评价烟草中As的形态,可为烟草的安全性评价提供参考.
关键词：烟草;砷(As);形态分析;超声溶剂提取;高效液相色谱;电感耦合等离子体质谱(ICP-MS);Tobacco;Arsenic;Speciation analysis;Ultrasonic solvent extraction;HPLC;ICP-MS
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452.UPLC-UV法快速测定烟草中游离茄尼醇的含量
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了简化烟草样品的前处理步骤,采用甲醇直接萃取烟草样品得到甲醇萃取液,优化超高效液相色谱的测试条件,测定了甲醇萃取液中的茄尼醇含量.结果表明:①最佳萃取条件为:萃取溶剂为甲醇,萃取温度25℃,萃取时间20 min;②茄尼醇工作曲线的浓度范围为10～200 mg/L时,质量浓度与峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.9997;③方法的检出限为0.054 mg/L,相对标准偏差为2.1％,平均回收率为105.5％.该方法可以快速、简便、准确地测试烟草中游离茄尼醇的含量.
关键词：茄尼醇;超高效液相色谱-紫外检测器;烟草;萃取
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453.不同浓度烯效唑及其施用方法对烟草漂浮苗生长的影响
[烟草制品业] [2014-01-15]
为明确烯效唑在培育烤烟壮苗中的应用效果,采用7种烯效唑浓度和两种施用方式,研究了烯效唑对烟苗根系、地上部生长发育及生理指标的影响.结果表明:基质中拌入烯效唑对烟苗地上部生长具有显著的抑制作用,与对照相比,烯效唑处理烟苗根冠比平均提高了128.2％,根系活力平均提高130.7％.叶面喷施不同浓度烯效唑表现为随浓度增加烟苗株高明显降低,但对烟苗茎围、鲜质量、干质量、叶绿素含量、根系活力和硝酸还原酶活性的影响均表现为“低促高抑”效应.其中适宜的浓度为20 mg/L,此浓度喷施烟苗后根冠比为0.105,叶绿素含量增加12.28％,根系活力和硝酸还原酶活性分别增加38.39％和154.33％.烟苗长至“5叶1心”时叶面喷施20 mg/L浓度的烯效唑可促进壮苗形成.
关键词：烯效唑;漂浮育苗;施用方式;生理指标
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454.茄尼醇的快速分析及在烟气摄入量评估中的应用
[烟草制品业] [2014-01-15]
建立了应用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定卷烟主流烟气和滤嘴中茄尼醇的方法,测定了21个牌号卷烟样品烟气中茄尼醇的释放量,并研究了滤嘴截留茄尼醇量与卷烟主流烟气中茄尼醇、烟碱、焦油释放量的相关性.结果表明:①采用本方法在7 min内即可完成对茄尼醇的检测,在0.5～100.0 μg/mL范围内线性良好(R2=1),定量限为0.47 μg/支,加标回收率为94.28％ ～106.70％,相对标准偏差(RSD)为2.06％；②不同牌号卷烟主流烟气中茄尼醇释放量差别较大,为34.47～300.00 μg/支；③滤嘴截留茄尼醇量与卷烟主流烟气茄尼醇、烟碱、焦油的R2分别为0.9967,0.9467和0.9954.该方法适合于卷烟主流烟气中茄尼醇的快速分析,可为吸烟者烟气主要有害成分暴露量评估方法的建立提供参考.
关键词：卷烟烟气;茄尼醇;高效液相色谱;烟气摄入量;滤嘴
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455.烟草侧芽生长相关基因克隆及RNAi载体的构建转化
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了培育打顶后不长侧芽的烟草植株,通过同源克隆,在烟草(品种K326)中得到了与侧芽生长相关基因的1个片断,将该片段序列通过BLAST检索Genbank同源比对,发现该基因同番茄的LS基因有非常高的同源序列,另外与水稻的MOC基因、拟南芥的LAS基因也有一定的同源性,命名为TLR基因.将TLR基因阅读框内640 bp的正向和反向片断构建到RNAi载体pHANNIBAL内含子两侧,再经NotI酶切回收约4300 bp目的片段,并插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含TLR基因片段正反向重复序列的植物表达载体pHANNIB AL-TLR-P ART27.将pHANNIB AL-TLR-P ART27质粒导入根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,没有得到转基因再生植株,推测这与TLR基因表达被抑制有关.
关键词：侧芽;转化烟草;RNAi;TLR基因
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456.烟草抗多种病毒应答基因的筛选
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了筛选烟草抗多种病毒的内源应答基因,以普通烟草和对应的转基因烟草(转有发卡结构)为材料,同时接种3种病毒,黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草普通花叶病毒(TMV)和马铃薯Y病毒(PVY).在接种病毒后6h和3周(转发卡结构烟草具有明显的抗病毒特性时)分别取样,进行转录组测序寻找抗多种病毒应答基因.进一步进行生物信息学分析得到40个差异基因,通过实时荧光定量PCR(qPCR)验证,获得了明显差异基因9个(酶类和功能蛋白类).
关键词：黄瓜花叶病毒;烟草花叶病毒;马铃薯Y病毒;qPCR;转录组测序;Cucumber mosaic virus;Tobacco mosaic virus;Potato virus Y;qPCR;Transcriptome sequencing
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457.烟草硝酸盐转运蛋白基因的克隆及表达分析
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了获得烟草NtNRT2.3基因的全长序列,进一步揭示其在烟草中的生物学功能,通过同源性搜索的方法,得到了烟草硝酸盐转运蛋白预测基因序列.采用RT-PCR技术,从烟草中成功克隆出一个硝酸盐转运蛋白体基因,将其命名为NtNRT2.3.其开放阅读框为1455bp,编码484个氨基酸.生物信息学分析表明,该基因与已报道的拟南芥、大豆、水稻等的NRT2家族基因具有高度同源性,且其编码的蛋白质具有NRT家族的共有结构特征.定量表达结果显示,NtNRT2.3基因在根中的表达量均高于茎和叶,表明NtNRT2.3基因在根系吸收硝酸盐过程中可能具有重要作用.
关键词：烟草;硝酸盐转运蛋白;克隆;表达;Tobacco;Nitrate transporter;Cloning;Expression
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458.不同烟草品种对白粉病的抗性
[烟草制品业] [2014-01-15]
为搜集烟草抗白粉病的种质材料,于2011年选取了21个烟草品种,用中国农业科学院烟草研究所保存的白粉病菌在温室中对其进行了人工接种鉴定;2012年选取了15个烟草品种,用采自四川的白粉病菌在隔离室中对其进行了人工接种鉴定.结果发现,对两个菌种均表现出免疫的品种为塘蓬;表现高抗的品种为NC89;中抗的品种为Beihart 1000-1、K346和吉烟9号;高感品种为中烟90和CF203;龙江91 1、G140、TI245、中烟100、云烟87、云烟85、中烟103、红花大金元、翠碧1号、G80、NC55、南江3号和净叶黄品种表现为中感或高感.Hicks品种对上述2个菌种的抗性表现存在一定差异,规律性不明显.
关键词：烟草;品种;白粉病;抗性评价;Tobacco;Cultivar;Powdery mildew;Resistance evaluation
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459.植烟土壤腐殖质组成特征及其与烟叶主要化学成分的关系
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了解我国植烟土壤腐殖质的组成特征及其与烟叶主要化学成分的关系,测定了14个植烟县共210个耕层土壤样品的腐殖质组分含量、组成比例和对应C3F,B2F烟叶的主要化学成分,分析了土壤腐殖质组成特征与土壤类型、pH、碱解氮含量的关系,并对土壤腐殖质组分含量、组成比例和烟叶主要化学成分进行了相关分析.结果表明:①植烟土壤腐殖质碳量集中在10～20 g/kg之间,胡敏酸、富里酸、胡敏素比例分别在11.05％～32.15％,12.00％～36.28％,38.43％～68.23％之间,胡富比在0.35～1.87之间.②不同土壤类型间腐殖质碳量由高到低的顺序为水稻土＞紫色土＞红壤＞棕壤＞褐土,腐殖化程度以水稻土程度最高,红壤最低；随着pH的升高,土壤腐殖质及组分碳量呈降低趋势；土壤腐殖质及组分碳量、腐殖化程度与土壤中碱解氮含量存在一定的正相关关系.③腐殖质各组分碳量与烟叶烟碱呈显著正相关,与淀粉、还原糖、氮碱比呈显著负相关；胡富比与B2F等级烟叶中烟碱含量呈显著正相关,与氮碱比呈显著负相关.
关键词：腐殖质;组成特征;烟叶;化学成分
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460.黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的分子鉴定
[烟草制品业] [2014-01-15]
为了揭示贵州省黔南烟区马铃薯Y病毒(PVY)株系分布及分子变异规律,先利用血清学方法初步鉴定PVY株系,再选择19个PVY分离物进行分子鉴定.结果表明,克隆的19个PVY cDNA片段全长均为1074 nts,包含1个801 nts的完整cp基因,编码266个氨基酸.序列比对发现,19个黔南PVY分离物cp基因核苷酸序列相似性为87.0％ ～ 99.9％,与GenBank登录的其他17个PVY株系cp基因序列相似性为86.6％ ～ 99.9％.系统进化树分析表明,黔南烟区19个PVY分离物中,有3个PVY分离物与PVYN株系和PVYNTN亲缘关系较近,而其他16个PVY分离物与PVYNN:O株系的亲缘关系最近.
关键词：烟草;马铃薯Y病毒;株系;cp基因;分子鉴定;Tobacco;Potato virus Y;Strain;cp gene;Molecular identification
027-87841330