关键词：CDCP1;基因克隆;融合表达
摘 要：目的构建携带CDCP1胞外段基因的原核表达载体。方法以A549的mRNA为模板,应用所设计的引物通过RT-PCR法扩增CDCP1胞外段基因;将PCR产物与pGEX-KG载体连接,获得重组质粒pGEX-KG/CDCP1;经双酶切、PCR及DNA序列测定进行鉴定;IPTG诱导表达。结果①RT-PCR扩增得到约270bp大小的CDCP1胞外段基因目的片段;②目的片段正确插入到pGEX-KG中;③经IPTG诱导表达,可见在相对分子质量约35kD处出现明显的诱导蛋白条带,与预期一致。结论成功构建了携带CDCP1胞外段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中获得大量表达。
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