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靶向抑制HIF-1α基因对舌癌细胞增殖活性的影响*
作者单位:徐香兰,燕杰,王丽,XU Xianglan,YAN Jie,WANG Li(天津医学高等专科学校病原生物与免疫学教研室 邮编300222)韩冰,HAN Bing(天津第三中心医院耳鼻喉科) 加工时间:2014-02-15 信息来源:天津医药
关键词:舌肿瘤;细胞系,肿瘤;RNA干扰;缺氧诱导因子1,α亚基;逆转录聚合酶链反应;印迹法,蛋白质;细胞增殖;小鼠,近交BALB C;tongue neoplasms;cell line,tumor;RNA interference;hypoxia-inducible factor 1,alpha subunit;re-verse transcriptase polymerase chain reaction;blotting,Western;cell proliferation;mice,inbred BALB C
摘 要:  目的研究靶向抑制乏氧诱导因子(HIF)-1α基因对Tca8113及Tscca舌癌细胞株增殖的影响。方法将HIF-1α基因的短发夹干扰RNA(shRNA)的表达载体与空载质粒分别转染人舌癌细胞中作为siHIF-1α组和空载组,半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白表达。软琼脂克隆形成实验观察细胞的增殖;细胞计数法检测活细胞的数量;流式细胞分析术检测细胞周期的分布;同时将舌癌细胞接种至裸鼠皮下,观察体内的成瘤情况。结果 HIF-1αshRNA质粒转染舌癌细胞株后,HIF-1α的mRNA及蛋白表达明显下降。siHIF-1α组细胞在软琼脂中形成克隆的能力显著下降。细胞计数表明siHIF-1α组活细胞数量减少。转染后乏氧培养48 h si-HIF-1α组细胞周期阻滞于G0/G1期。舌癌细胞移植到裸鼠体内数天后siHIF-1α组成瘤体积明显小于空载组(P<0.05)。结论 HIF-1α基因能够促进舌癌细胞增殖活性,有可能成为未来治疗舌癌的一个潜在作用靶点。
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