关键词：单宁酶；交联酶聚集体；无载体固定化；没食子酸丙酯；应用
摘 要：交联酶聚集体法(cross-linked enzyme aggregates.CLEAs)是一种新型的无载体酶固定化方法.使用该法固定化黑曲霉产单宁酶,制备无载体固定化单宁酶(Cross-linked enzyme aggregates tannase,CLEAs-TA),并对其制备条件、结构特征、酶学性质进行分析.结果表明,最优制备条件为单宁酶游离粗酶液在冰水浴中经80％的硫酸铵沉淀30 min后,以1.5％戊二醛水溶液进行酶聚集体交联反应,可获得较高活性、较高稳定性的交联酶聚集体,酶活回收率达47.33％,对酯键水解作用的最适温度、最适pH值分别为50 ℃、4.5,与游离酶相比,表现更高的pH及温度稳定性,重复使用6次后,活力剩余32.86％,其良好的操作稳定性有利于没食子酸丙酯高效转化为没食子酸及广泛应用于水解茶饮料中单宁的反应.