关键词：两步盐析；双水相萃取；提取纯化；藻蓝蛋白
摘 要：以巢湖新鲜蓝藻为处理对象，采取冻融破壁的方式获取藻蓝蛋白的粗提液，采取两步盐析联合双水相萃取的方法提取纯化藻蓝蛋白。运用0.618 法选点实验研究了两步盐析中(NH4)2SO4 不同饱和度对提取纯化影响，构建了PEG/(NH4)2SO4 的双水相体系，综合考虑PEG 分子量、PEG 质量分数、(NH4)2SO4 质量分数、pH 值和藻蓝蛋白质量浓度对提取纯化藻蓝蛋白的影响。结果表明：室温250C 下，一步盐析时(NH4)2SO4的最佳饱和度为21%，二步盐析时(NH4)2SO4 的最佳饱和度为30%。两步盐析后得到的藻蓝蛋白构建成PEG1000/(NH4)2SO4 的双水相体系后，当PEG 分子量为1000，当PEG1000 质量分数为10%，(NH4)2SO4 质量分数为25%时，藻蓝蛋白的纯度可达3.45。