关键词：茂原链霉菌；原生质体；再生；融合；基因组重排
摘 要：【目的】研究并建立产谷氨酰胺转氨酶茂原链霉菌原生质体制备技术，通过原生质体融合技术筛选高产菌株。【方法】以溶菌酶处理茂原链霉菌获得原生质体，采用原生质体融合技术，通过96 孔板高通量初筛，试管复筛，摇瓶验证选育高产菌株。【结果】茂原链霉菌形成的原生质体再生出的菌落直径比较小，而菌丝生成的菌落直径比较大，两种形态的菌落96 孔板发酵后酶活有显著性差异。不同的茂原链霉菌株制备原生质体，酶解程度、原生质体纯度、再生比率有很大的差异，再生比率最高可达1804.25%，最低仅为12.76%。原生质融合后的高产菌株，选取96 孔板初筛酶活前3%的菌株进行试管发酵，得到高产菌株比例为32%，酶活比亲本高22.4%，经摇瓶验证产酶比对照提高16.28%【结论】利用基因组重排技术，可以初步对茂原链霉菌进行高产菌株选育。