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三聚氰胺免疫亲和柱的制备和测试
作者单位:江南大学食品学院,江苏无锡,214122 加工时间:2014-03-15 信息来源:食品与生物技术学报
关键词:三聚氰胺;免疫亲和层析柱;抗体;富集;melamine;immunoaffinity column;antibody;condensation
摘 要:制备高容量的三聚氰胺免疫亲和层析柱,以识别三聚氰胺的单克隆抗体为配体,采用硅烷化方法,对抗体进行包埋,装填小柱.采用三聚氰胺系列标准溶液进行富集试验,通过紫外光谱(三聚氰胺最大紫外吸收波长240 nm)和液相色谱-质谱测试流出液和洗脱液中三聚氰胺的浓度,确定了免疫亲和柱的柱容量为16.47 μg.试验中对亲和小柱的润洗溶液、上样溶液、洗脱溶液和再生溶液进行了优化,结果表明,该免疫亲和层析柱的富集效率可达66倍.以回收率高于60%计,该柱的再生次数至少为5次.
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