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人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白的纯化及活性鉴定
作者:李波;段作营;张红梅;李华钟;唐瑜菁;雷楗勇;陈蕴;金坚 作者单位:江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122;泰山医学院生命科学系,山东泰安,271016;江南大学医药学院,江苏无锡214122 加工时间:2013-10-15 信息来源:《食品与生物技术学报》
关键词:人白介素2;人血清白蛋白;融合蛋白;纯化
摘 要:采用课题组已构建的携带人白介素2-人血清白蛋白融合蛋白(rhIL-2-HSA)基因的重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115进行rhIL-2-HSA的分离纯化研究.发酵上清液经超滤浓缩、Blue Sepharose亲和层析、Octyl Sepharose疏水层析和DEAE Sepharose离子交换层析纯化获得较高纯度的目的产物,SDS-PAGE检测为单一条带.Western Blot分析结果显示,目的产物同时具有HSA和IL-2的抗原性,为HSA和IL-2的融合分子.经CTLL-2/MTT细胞增殖法测定,纯化的融合蛋白的生物学活性为1.147×107 IU/mg.
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