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河豚毒素DNA 适配子的制备及应用
作者:邵碧英;陈彬;陈文炳;杨方;缪婷玉;彭娟 作者单位:福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心;福建省检验检疫技术研究重点实验室 加工时间:2014-12-01 信息来源:食品科学 索取原文[6 页]
关键词:河豚毒素;适配子;荧光染料;检测
摘 要:人工合成78 个碱基的随机ssDNA 文库,采用SELEX 技术与诱变PCR 结合的方法,通过筛选富集、克隆、测序,获得了与河豚毒素(TTX)特异结合的单克隆DNA 适配子A3。DNA 适配子A3 的二级结构主要为茎环结构,与河豚毒素的亲和力为1.254。对适配子和河豚毒素结合的PBS 缓冲液pH 值、荧光染料结合时间进行了优化,结果表明最适pH 值为7.5,最佳结合时间为10min。建立了快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-荧光染料法,对河豚毒素的检出限为10-6mo1/L。
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