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菠萝茎蛋白酶的纯化及酶活力受超声处理影响的机理
作者:陈小丽;黄卓烈 作者单位:广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;华南农业大学生命科学学院,广州510642;华南农业大学生命科学学院,广州510642 加工时间:2013-10-15 信息来源:《食品与生物技术学报》
关键词:菠萝茎蛋白酶;纯化;酶活力;超声波;构象
摘 要:对菠萝茎蛋白酶进行纯化和鉴定,并研究酶活力受超声处理影响的机理.采用羧甲基纤维素柱层析纯化、PAGE鉴定纯度,测定纯化的酶经超声波处理后的酶活性、动力学参数以及紫外和荧光光谱.柱层析分离出3个蛋白峰区域,其中第二蛋白峰经电泳鉴定纯度较高.酶经超声处理后Km变小,Vm也减小;紫外吸收光谱不变,而差示光谱出现了明显的正峰和负峰,荧光发射光谱基本不变.羧甲基纤维素柱层析对菠萝茎蛋白酶纯化效果较好,超声处理可能通过改变菠萝茎蛋白酶的构象从而改变酶活力.
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