关键词：过氧化氢酶;正交试验;重组E.coli;恒速补料;一次性补料;catalase;orthogonal experiment;stirring speed;constant supplement;disposable supplement
摘 要：采用正交试验策略,分析了不同关键因素对重组E.coli发酵生产过氧化氢酶(CAT)的影响,确定CAT合成的最优摇瓶发酵条件为:甘油5g/L、酵母粉35 g/L、初始pH 7.5、诱导温度为30℃.在3L发酵罐发酵生产CAT过程中,当转速为300 r/min时,酶活力最高为201 17.2U/mL,最适发酵产酶初始甘油质量浓度为10 g/L.以0.67 g/(L·h)的速率进行流加甘油时,最高酶活达28 243.0 U/mL.在诱导开始时一次性补入16.7 g/L甘油,当发酵至47 h时CAT酶活达到最大值为50 369.5 U/mL,为优化前酶产量的2.5倍.