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摘 要：　　TRPC（瞬时受体电位阳离子通道）是与钙离子内流有关的非选择性阳离子通道。其通过磷酸化实现对通路和活性的调节。其中，TRPC6在肾脏中主要定位于足细胞上，对足细胞内钙离子浓度的调节发挥重要作用。TRPC6可以由Fyn激酶（Src家族中的一种酪氨酸激酶）磷酸化。实验证实Fyn激酶磷酸化TRPC6后可以使TRPC6活性增加，这一现象可以被TRPC6的Thr69位的蛋白激酶G和Ser448位的蛋白激酶C抑制。已有研究指出，TRPC6在非刺激条件下的人胚胎肾细胞系（HEK293）中可以发生基本磷酸化，但其磷酸化的位点还未确定。为了研究这一磷酸化的机制，本实验运用了MS（质量光谱法）/MS结合代谢标记的方法，证实了在未受刺激细胞中TRPC6的814位点丝氨酸(Ser 814)发生磷酸化。实验发现，当Ser 814突变为丙氨酸时会造成未受刺激细胞TRPC6的32P基本磷酸化减少50%，证实Ser 814是未受刺激细胞磷酸化的主要位点。但与野生型的TRPC6相比，Ser 814的突变体的TRPC6的活性、表达水平以及通道运输均无明显变化。TRPC6的序列分析显示Ser814与酪氨酸激酶Ⅱ（CK2）有共同的磷酸化位点，并且CK2识别的序列往往是酸性氨基酸密集的区域，可以催化-2到+7位点的酸性残基发生磷酸化，而TRPC6中Ser814与谷氨酸以及天冬氨酸构成酸性环境，适合CK2识别。另外，CK2可以抑制结构活性，因此推测，在本研究中CK2可能是Ser 814磷酸化潜在的激酶。然而实验结果表明CK2与TRPC6的磷酸化无关，不能改变TRPC6的活性，即CK2不是参与其磷酸化作用的激酶。总之，本次研究鉴定了在TRPC6上的一种新的基础磷酸化位点（Ser814），并证实CK2与这一位点的磷酸化无关。