毛竹微管蛋白基因PeTua3的原核表达及其功能初步研究
关键词:毛竹;细胞骨架;微管蛋白基因;原核表达;细胞生长
摘 要:作为细胞骨架的重要组成部分,微管蛋白在细胞壁发育过程中起着重要的调控作用.采用RT-PCR技术从毛竹叶片中克隆到一个微管蛋白(Tua3)同源基因的cDNA序列,长1356 bp,编码451个氨基酸,命名为PeTua3.构建原核表达载体pET-32b-PeTua3,并将其转入大肠杆菌中诱导表达.蛋白电泳检测结果表明:温度和诱导时间对PeTua3基因蛋白的表达影响差异显著,其中,在37℃用0.4 mmol·L-1 IPTG诱导2h的表达效果最好.用PeTua3基因体外表达的重组蛋白处理拟南芥种子,其幼苗上胚轴明显增粗,侧根增多;超薄切片显微观察显示,重组蛋白处理的拟南芥上胚轴和主根的薄壁细胞数量均增多,细胞体积变大,维管束增粗.