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舞毒蛾核型多角体病毒PCR检测技术的建立
作者:陶婧;韩崇选;张永安;王玉珠;曲良建;王青华 作者单位:西北农林科技大学林学院,陕西杨凌712100;中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,国家林业局森林保护学重点实验室,北京100091 加工时间:2014-02-15 信息来源:《林业科学研究》
关键词:舞毒蛾核型多角体病毒;PCR;微量检测;egt基因
摘 要:根据舞毒蛾核型多角体病毒(LdMNPV)的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因(egt)设计一对特异性引物.成功建立了LdMNPV的PCR检测技术体系,其对LdMNPV基因组的灵敏度可达到1fg·mL-1.应用该技术体系从舞毒蛾带毒幼虫、卵、蛹的基因组中扩增出目的片段,证明了这一技术的可行性.对不同浓度的多角体悬液的扩增结果显示:其检测最低量为5 OBs·mL-1.形态学研究表明:从内蒙舞毒蛾体内分离到的LdMNPV中,少数表面有凹陷的孔洞,病毒粒子从这些孔洞中游离出来,这也阐明了此技术能够从多角体悬液中扩增出目的片段的原因.在将来LdMNPV的检测中,可用虫体进行研磨过滤离心得到的组织液作为模板进行扩增.
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