RP-HPLC法同时测定酿酒酵母胞内磷酸腺苷和辅酶Ⅰ
关键词:高效液相色谱;酿酒酵母;磷酸腺苷;辅酶Ⅰ
摘 要:为准确监控酿酒酵母胞内磷酸腺苷和辅酶Ⅰ的代谢情况,作者建立了酿酒酵母胞内磷酸腺苷和辅酶Ⅰ的高效液相色谱分析方法.胞内代谢物经液氮研磨提取后,采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm)分离,流动相0.025 mmol/L三乙胺-磷酸缓冲液(pH6.0)与乙腈梯度洗脱,流速1 mL/mim,检测波长254 nm.在此条件下,3种磷酸腺苷和两种辅酶Ⅰ达到了较好的分离效果.回收率在98.30%~103.42%之间,RSD<3.00%.结果表明,本法灵敏、准确、重现性好,可用于酿酒酵母胞内磷酸腺苷和辅酶Ⅰ摩尔质量浓度的测定.