关键词：山苍子；基因组DNA；AFLP；多态性引物
摘 要：通过对山苍子幼嫩叶片、顶芽、花蕾3种组织的DNA提取效果分析和对影响酶切及选择性扩增效果的4个主要因素(酶切时间、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度)的比较研究,建立了适合于山苍子AFLP分析的技术体系.结果表明,山苍子的顶芽是较好的DNA提取材料；山苍子基因组DNA经5 UEcoRI和5 UMseI酶切lh即可完全酶切；最佳的选择性扩增体系为20 μL反应体系中含有1.0U rTaq聚合酶、2.0 μL 10×PCR缓冲液、1.8 μL 25mmol·L-1MgCl2、1.4 μL 2.5 mmol·L-1dNTP、100 ng·μL-1引物各1.0 μL.使用该反应体系获得了清晰、稳定的DNA指纹图谱,并筛选出10对多态性较好的AFLP引物组合,为利用AFLP标记技术进一步开展山苍子种群遗传结构、遗传分化等研究奠定了基础.