靶向P75NTR的siRNA技术诱导U251胶质瘤细胞凋亡的实验研究
关键词:神经胶质瘤;RNA干扰;RNA,小分子干扰;基因疗法;细胞凋亡;细胞,培养的
摘 要:目的:利用靶向P75神经营养因子受体(P75NTR)基因的小干扰(siRNA)技术诱导胶质瘤凋亡.方法:利用脂质体介导P75NTR-siRNA质粒转染U251胶质瘤细胞系,RT-PCR方法检测P75NTR的mRNA表达以确定基因沉默效果,绘制细胞生长曲线,原位细胞凋亡实验检测细胞凋亡情况,Western blot方法检测稳定转染后第3天时P75NTR、促凋亡基因Caspase-3和凋亡抑制基因Bcl-2的蛋白表达.结果:转染P75NTR siRNA质粒后U251细胞P75NTR的mRNA表达水平显著下降,细胞增殖能力下降,凋亡细胞数量增加.与对照组和空载组比较,P75NTR与Bcl-2在RNAi组蛋白表达水平显著降低,Caspase-3则明显升高.结论:靶向P75NTR的siRNA技术可通过调控凋亡相关基因表达机制诱导胶质瘤细胞凋亡.