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半滑舌鳎Dmrt1蛋白表达、纯化及功能
作者单位:胡乔木,HU Qiaomu(中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛 266071; 上海海洋大学,上海 201306)王凯琳,WANG Kailin(上海海洋大学,上海,201306)陈松林,CHEN Songlin(中国水产科学研究院 黄海水产研究所,山东 青岛,266071) 加工时间:2014-05-15 信息来源:中国水产科学
关键词:半滑舌鳎;Dmrt1;蛋白表达;功能;性别决定;Cynoglossus semilaevis;Dmrt1;protein expression;elementary function
摘 要:通过分析半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis) Dmrt1重组蛋白注射卵巢后基因表达调控,探讨Dmrt1在半滑舌鳎性别决定与分化中的功能。实验利用原核表达系统(Pet-32a)对半滑舌鳎Dmrt1基因进行重组表达,并通过亲和层析纯化获得了重组目的蛋白(Pet-32-dmrt1)。重组蛋白注射卵巢后实时定量PCR分析结果显示, Cyp19a和Foxl2在6~24 h内两基因表达量均显著下调, Sox9a基因表达量在6~24 h内有显著上调,但48 h后3个基因的表达量逐渐恢复正常表达水平。研究结果证实, Dmrt1重组蛋白具有生物活性,且对性别相关基因表达调控具有一定的影响,在性别决定中发挥一定作用。
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