聚唾液酸修饰CuZn-SOD及其形态和稳定性研究
关键词:聚唾液酸;铜锌超氧化物歧化酶;交联修饰;酶活稳定性
摘 要:聚唾液酸( Polysialic acid,PSA)因其更为有效的安全性,被公认为传统药用缓释材料——聚乙二醇(PEG)的理想替代材料.作者对蛋白质药物——铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的聚唾液酸修饰进行了初步研究.研究了修饰反应的主要条件:聚唾液酸经高碘酸钾氧化后生成的活化体,与超氧化物歧化酶以40∶1的摩尔比反应24 h,可以达到理想修饰效果,生成的聚唾液酸修饰的超氧化物歧化酶衍生物(PSA-SOD)平均交联比达到了3.9±0.3.该衍生物经过SDS-PAGE电泳和原子力显微镜(AFM)检测测得其平均相对分子质量为90 000~100 000,分子粒径为10~15 nm,约为天然超氧化物歧化酶的4倍.除此,PSA-SOD呈单颗粒包覆和多颗粒包覆两种显微形态.PSA-SOD进行稳定性试验表明,经聚唾液酸修饰的超氧化物歧化酶的酸碱稳定性、热稳定性和抗酶解稳定性都有了较大程度的提高.