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副溶血弧菌融合蛋白FlaA-OmpK疫苗的制备及免疫保护作用
作者:樊海平;吴斌;郭养浩;马振宁;唐凤翔;郑磊 作者单位:福建省淡水水产研究所,福建福州350002;福州大学药物生物技术与工程研究所,福建福州350002;福州大学药物生物技术与工程研究所,福建福州350002;福建省淡水水产研究所,福建福州350002 加工时间:2014-05-15 信息来源:《中国水产科学》
关键词:副溶血弧菌;融合蛋白FlaA-Ompk;免疫原性;口服疫苗
摘 要:采用延伸PCR技术拼接副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus VpATCC 17802)的外膜蛋白K基因ompK和鞭毛蛋白A基因flaA,获得融合基因flaA-ompK.制备高纯度的r-OmpK,r-FlaA及r-FlaA-OmpK蛋白.分别以所制备的OmpK、FlaA-OmpK和混合蛋白OmpK+FlaA作为免疫原,通过口服及注射的方法免疫黑石斑鱼(Centropristis striata),研究其免疫原性及对野生副溶血弧菌(Vp89)感染的免疫保护作用.ELISA分析结果表明,注射FlaA-OmpK 组抗体效价最高,是OmpK组的2倍,是混合蛋白组的4倍,注射FlaA-Ompk提供的免疫保护率达到80%.本工作制备了FlaA-Ompk肠溶口服微球疫苗,口服免疫组血清抗体效价低于注射组血清抗体效价,口服FlaA-Ompk提供的免疫保护率达到50%.研究结果显示融合蛋白FlaA-Ompk具有良好的免疫原性,可作为多元弧菌疫苗抗原成份.
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