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稳定表达CRFR1的HEK293细胞株建立与功能鉴定
作者:葛治娟;于金梅;马晓芸;刘晓燕;郑建全; 加工时间:2014-09-12 信息来源:中国药理学通报
关键词:促肾上腺皮质激素释放因子;CRFR1;HEK293细胞;转染;cAMP;G蛋白偶联受体
摘 要:目的建立稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,并鉴定cAMP评价体系构建是否成功。方法采用Lipofectamine2000将CRFR1质粒转染至HEK293细胞中,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术、RT-PCR法、免疫荧光法证实稳定表达CRFR1细胞株构建成功。并用CRF刺激稳定表达CRFR1的HEK293细胞株,绘制CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAMP的量效曲线。结果 Western blot、RT-PCR、免疫荧光结果表明,CRFR1受体在HEK293细胞系中成功表达。cAMP释放量效实验显示,CRF刺激HEK293-CRFR1细胞释放cAM...
内 容:原文可通过湖北省科技信息共享服务平台(http://www.hbstl.org.cn)获取
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