Notch1(NICD)过表达真核载体构建及对大鼠BMSCs增殖分化的影响
关键词:细胞增殖;细胞分化;转染;神经胶质原纤维酸性蛋白质;磷酸丙酮酸水合酶;Notch信号通路;骨髓间充质干细胞;诱导;Notch1(NICD)
摘 要:目的探讨过表达Notch1(NICD)基因对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖分化的影响。方法构建Notch1(NICD)过表达真核载体,实验分正常对照组(CON组,不做转染)、阳性对照组(空载体组,将质粒pEGFP-N1转染BMSCs)和转染组(将重组质粒pEGFP-N1-NICD转染BMSCs)。转染48 h后观察细胞一般状态,Real-timePCR和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Notch1基因和蛋白表达,流式检测转染后细胞凋亡、细胞周期,MTT检测细胞增殖情况。结果重组质粒pEGFP-N1-NICD编码序列与设计...
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