关键词：周期性机械牵张;;肺泡上皮细胞;;埃兹蛋白;;磷酸化;;肺损伤
摘 要：目的探讨周期性机械牵张对人肺泡上皮细胞(A549)埃兹蛋白(ezrin)磷酸化的影响。方法经鉴定后将A549细胞培养在Ⅰ型胶原包被的Bioflex六孔板上,随机分组后进行机械牵张强度试验(给A549细胞施加5%、10%和20%3个不同强度的周期性机械牵张应力,牵拉4 h)和时相试验(给A549细胞施加强度为20%的周期性机械牵张应力,分别牵拉1、2、4、8和12 h),每个试验均设对照组,对照组不行牵拉。应用Western blot技术检测细胞内ezrin及p-ezrin蛋白的表达情况,以β-actin作为内参。结果(1)对照组A549细胞中ezrin和p-ezrin蛋白均有少量表达,与对照组相比,周期性机械牵张对ezrin蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。(2)应力大小试验中,与对照组相比,5%牵张强度对p-ezrin蛋白表达差异无统计学意义;牵张强度从10%开始,p-ezrin蛋白表达随牵张应力呈强度依赖性增加,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在施加20%机械牵张应力下,p-ezrin表达量表现为牵拉时间依赖性且差异有统计学意义(P<0.05)。结论周期性机械牵张诱导A549细胞ezrin蛋白磷酸化,其可能参与了周期性机械牵张诱导肺泡上皮细胞损伤的调控过程。
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