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建鲤催乳素受体基因全长cDNA的克隆、序列分析与组织表达
作者单位:李冰,LI Bing(中国水产科学研究院 淡水渔业研究中心,农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室,江苏 无锡 214081)王杰,朱健,WANG Jie,ZHU Jian(中国水产科学研究院 淡水渔业研究中心,农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室,江苏 无锡 214081; 南京农业大学 无锡渔业学院,江苏 无锡 214081)张成锋,ZHANG Chengfeng(南京农业大学 无锡渔业学院,江苏 无锡,214081) 加工时间:2014-05-15 信息来源:中国水产科学
关键词:建鲤;催乳素受体;克隆;序列分析;组织表达;Cyprinuscarpio var. jian;prolactin receptor;clone;sequence analysis;tissue expression
摘 要:  为了解催乳素受体(Prolactin Receptor, PRLR)的基因序列及其在建鲤(Cyprinus carpio var. jian)渗透调节组织中的表达情况,采用同源克隆和末端快速扩增(rapid amplication of cDNA ends, RACE)的方法分离克隆了建鲤PRLR基因全长cDNA,得到2440 bp的全长cDNA,包括1821 bp的开放阅读框(ORF),213 bp的5′末端非编码区(UTR)以及406 bp 的3′末端非编码区(UTR)。对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度在37.46%~87.25%,与鲤(Cyprinus carpio)的氨基酸相似度最高(87.25%),鲫(Carassius auratus)次之(86.86%),和金头鲷(Sparus aurata)的相似度较低(41.87%),和人(Homo sapiens)最低(37.46%),表明不同物种间的PRLR的氨基酸序列具有较高的保守性。用实时定量PCR (RT-PCR)检测该基因在建鲤脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾、皮肤中催乳素受体的相对表达量,其中鳃、肾、肠3个主要渗透调节组织的表达量较高,这表明建鲤的渗透调节组织是PRLR的主要表达场所,从定量角度提示了催乳素(prolactin, PRL)通过 PRLR 的表达,作用于渗透调节组织从而行使其渗透压调节功能。本研究旨在为进一步探索建鲤的渗透调控机制提供基础依据。
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