关键词：高效阴离子色谱-脉冲安培检测(HPAEC-PAD);脑膜炎球菌结合疫苗;A群多糖含量;6-磷酸甘露糖胺;定量检测方法验证
摘 要：目的:采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)测定A群脑膜炎球菌多糖及脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中6-磷酸甘露糖胺的含量,并对该方法进行验证,实现微量A群脑膜炎球菌多糖的定量检测。方法:A群脑膜炎球菌多糖酸水解处理后,经1H、13C NMR及COSY谱图分析,产物结构为6-磷酸甘露糖胺单体,然后进样CarboPacPA10柱,氢氧化钠-醋酸钠梯度洗脱,脉冲安培检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密度及准确性验证,并进行初步应用。结果:确定样品的水解条件为2 mol·L-1三氟乙酸煮沸5 h。载体蛋白破伤风类毒素对检测无干扰;在1~10μg·mL-...
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