采用同源重组技术构建金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株
作者：康铭松；周锐；陈焕春；史贤明；唐俊妮
作者单位：华中农业大学农业微生物国家重点实验室,湖北武汉4300702;上海交通大学农业与生物学院,上海200240;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041
加工时间：2013-10-15
信息来源：《食品与生物技术学报》
关键词：金黄色葡萄球菌；sae基因；同源重组；突变株构建
摘 要：针对金黄色葡萄球菌sae基因前后两段序列设计两对引物,PCR扩增出sae基因上下游同源臂序列,克隆到穿梭载体pBT2中;两段序列之间用来自质粒p646的Em抗性基因片段连接,作为筛选标记,从而构建同源重组穿梭质粒pBT2△sae;将pBT2△sae电转化到金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,40℃经过七轮培养,进行抗性培养基筛选和PCR验证,以及RT-PCR观察基因表达水平.获得一株金黄色葡萄球菌sae基因缺失突变株RN△sae,为进一步研究sae基因的调控机制等提供有用的实验材料.
027-87841330