关键词：多酚氧化酶；基因克隆；原核表达；酶促合成；茶黄素
摘 要：通过PCR方法克隆丰水梨PPO基因全长，并将其登录Genebank，登录号JQ861265。基因全长1782 bp，无内含子，编码的PPO 属于亲水性蛋白质，无跨膜结构，含有593 个氨基酸，分子量约为65.8 kDa，理论等电点为8.4。N 端含有一段由47 个氨基酸组成的转运肽。去除转运肽的成熟PPO 分子量为60.8 kDa，理论等电点为6.69。PPO 中含有两个铜离子结合区，主要位于PPO 二级结构中的α-螺旋区域中。原核诱导目的蛋白在诱导3~6 h 后积累量较大。诱导蛋白（PPO 前体和成熟PPO）均能氧化儿茶素形成茶黄素。