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人源神经降压素受体-1稳转细胞系的建立及其应用
作者:张果;孙涛;刘慧娟;牛国君;徐峰; 加工时间:2014-11-26 信息来源:药学学报
关键词:CHO/NTR1;钙离子浓度检测;神经降压素受体
摘 要:神经降压素受体-1(neurotensin receptor-1,NTR1)是G蛋白偶联受体家族的成员,调节细胞内钙离子的水平。NTR1与多种疾病的发生发展密切相关。为寻找与NTR1相关的拮抗剂,建立了稳定表达人源NTR1蛋白的中国仓鼠卵巢细胞系CHO/NTR1。将重组质粒利用脂质体转染的方法转入CHO细胞,加入G418抗生素进行筛选,采用Western blotting和钙离子浓度检测来评判CHO/NTR1细胞系是否构建成功。通过钙离子浓度检测,可以得到NTR1的天然配体神经降压素(neurotensin,NT)的EC50值和NTR1的已知拮抗剂SR48692的IC50值。结果提示,人源CH...
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