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沉默Rock2对肝癌细胞增殖及凋亡作用的研究
作者:刘天德;袁荣发;王庆诺;蒋成行;杨志强;邵江华 作者单位:330006 南昌大学第二附属医院肝胆外科;江西省分子医学重点实验室 加工时间:2014-04-15 信息来源:《天津医药》
关键词:癌,肝细胞;细胞增殖;细胞凋亡;肝肿瘤;蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶;转染;基因沉默
摘 要:目的:探讨沉默Rock2基因对人肝癌细胞Huh-7和HepG2增殖和凋亡作用的影响.方法:实验分为空白对照组、干扰无意义组、转染PBS组及干扰Rock2组.将Rock2干扰质粒shRock2转染到人肝癌细胞Huh-7和HepG2中,通过实时荧光定量PCR检测Rock2 mRNA的表达水平;Western blot检测Rock2蛋白的表达水平;MTT比色法检测沉默Rock2后对Huh-7和HepG2细胞增殖抑制的影响;流式细胞术检测沉默Rock2对Huh-7和HepG2细胞周期及早期凋亡的变化.结果:将shRock2转染肝癌细胞系Huh-7和HepG2后,Rock2 mRNA以及Rock2蛋白的表达水平均明显下降.沉默Rock2表达后,MTT结果显示Huh-7和HepG2细胞较对照组细胞增殖能力明显减弱(P<0.01);Huh-7和HepG2细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);肝癌细胞的早期凋亡较对照组明显增加(P<0.01).结论:沉默Rock2能明显抑制肝癌细胞系Huh-7和HepG2的增殖,并诱导其早期凋亡,提示Rock2可作为肝癌基因治疗的一个新的分子靶点.
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