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微粒体体系中胆红素及其代谢产物测定方法的建立
作者:汪祺;张玉杰;戴忠;马双成; 加工时间:2016-04-18 信息来源:药物分析杂志
关键词:胆红素;代谢产物;重组人UDP-葡萄糖醛酸转移酶1A1;超高效液相色谱-质谱联用;肝微粒体
摘 要:目的:建立人肝微粒体(HLM),大鼠肝微粒体(RLM)及重组人UDP-葡萄糖醛酸转移酶1A1(rh UGT1A1)体系中底物胆红素及其葡萄糖醛酸代谢产物的测定方法,为进一步研究药物影响胆红素肝代谢奠定基础。方法:采用UPLC及MS/MS联用技术对胆红素及其代谢产物进行定性及定量研究,确定检测方法。优化HLM、RLM、rh UGT1A1体系终止反应条件、反应时间及反应蛋白浓度,确定反应体系条件。结果:初步鉴定了底物胆红素及其代谢物单葡萄糖醛酸胆红素(BMG1及BMG2)及双葡萄糖醛酸胆红素(BDG)。确定了体系终止反应条件为反应结束时,加入冰乙腈-甲醇(2∶1,含抗坏血酸浓度为200μmol·L...
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