关键词：白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性;干细胞;树突细胞;杀伤细胞;P糖蛋白;细胞凋亡;K562细胞
摘 要：目的 研究慢性粒细胞白血病(CML)源干细胞体外诱导生成树突细胞(DC)与同来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对白血病耐药株K562/A02干细胞(LSC)的杀伤作用.方法 提取BCR/ABL阳性CML患者骨髓单个核细胞(BMMC),流式分选技术分离纯化CD34+CD38-干细胞,体外扩增诱导生成DC.取同来源的CML患者BMMC诱导出CIK.DC与CIK共培养,流式细胞术(FCM)检测其对K562/A02干细胞的凋亡及杀伤情况.光镜下观察细胞形态,FCM分析DC和CIK免疫表型、K562/A02及DC的p-糖蛋白(P-gp)表达情况,荧光原位杂交(FISH)检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达.结果 LSC能成功诱导为成熟DC,且LSC来源DC的P-gp阳性表达率约为51.8％.DC免疫表型CD40、CD80、CD83、CD86以及HLA-DR的表达率均高于共培养前；共培养后CIK免疫表型CD3、CD8、CD56的表达率高于单独培养的CIK,差异均有统计学意义(P＜0.01).DC与CIK共培养后对CD34+CD38干细胞的杀伤效应明显高于单独培养的CIK.CIK、DC-CIK均可诱导K562/A02细胞凋亡,凋亡率分别为(32.56±3.20)％、(40.21±3.09)％,且2组比较差异有统计学意义(P＜0.01),但对CD34+CD38干细胞无明显的诱导凋亡作用.结论 来源LSC的DC功能正常,同时该来源DC联合CIK能杀伤K562/A02干细胞,但对其无明显凋亡作用.