关键词：金黄色葡萄球菌;;测试片培养基;;食品检验;;快速检测
摘 要：食品中金黄色葡萄球菌的定量检测方法主要为传统的平板培养,同时需要进行后续的生化鉴定,步骤繁琐,时间长,对于现场检测行不通。其次还有测试片法、显色培养基计数法、PCR技术、荧光PCR方法、免疫学方法等。本文主要对金黄色葡萄球菌测试片基质的配方进行筛选,最后对测试片基质的性能进行验证。将测试片基质附着在固体载体上,用冷水可凝胶、无纺布、塑料薄膜等材料组合成金黄色葡萄球菌测试片,也可以进一步提高本产品的试用价值。目的:根据金黄色葡萄球菌产生的酶与底物结合发生显色反应,研制金黄色葡萄球菌测试片的基质,该基质配方是在营养琼脂培养基的基础上添加一些营养物质、促进剂、抑制剂、冷凝胶及显色底物等。方法:在营养琼脂培养基的基础上,分别添加营养物质(蛋白胨、酵母粉)、促进剂(丙酮酸钠、甘氨酸)、抑制剂(氯化钠、氯化锂、亚碲酸钾、甘氨酸)、冷凝胶(瓜尔胶、聚丙烯酸钠),通过单因素试验筛选出一定范围值,正交试验得出最佳配比。最后在基础培养基中添加不同浓度的显色底物,通过对培养基显色效果的观察,最后得出金黄色葡萄球菌测试片基质。在37℃培养24h,分别从特异性、灵敏度、培养时间、稳定性、生长率和不同食品检测与国标BP平板比较等方面综合验证金黄色葡萄球菌测试片基质的检测效果。结果:金黄色葡萄球菌测试片培养基的配方通过单因素试验和正交试验得出:蛋白胨20g/L、酵母粉3g/L、丙酮酸钠8g/L、甘氨酸7.5g/L、氯化钠50g/L、氯化锂5g/L、亚碲酸钾40mg/L、苯乙醇3mL/L,pH值为7.4。金黄色葡萄球菌测试片基质特异性较好,杂菌均不生长,非常容易观察。灵敏度可以达到个位数,在37℃培养最佳时间为24h,在4℃和28℃存放不同时间检测结果无差异,36℃存放时间越长,对检测结果影响越大,测试片基质的生长率为81.2±2.90%个/100,与国标法对比阳性检出率提高了7%。结论:金黄色葡萄球菌测试片基质具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、时间短、操作简便等优点,适用于食品中金黄色葡萄球菌的快速检验。
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