关键词：肺肿瘤;细胞系,肿瘤;细胞增殖;细胞周期;细胞周期蛋白D1;细胞周期蛋白依赖激酶4;周期素依赖激酶抑制剂p21;周期素依赖激酶抑制剂p27;增殖细胞核抗原;粗毛豚草素
摘 要：目的 探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制.方法 粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot 检测周期蛋白cyclinD1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21和p27的表达;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达.结果 A-549细胞经不同浓度(15、30、60、120 μmol/L)粗毛豚草素作用72 h后,细胞存活率分别为(57.30±3.92)%、(43.91±4.32)%、(17.82±2.73)%和(13.20±2.46)%,均低于对照组(96.30±2.08)%,差异有统计学意义(P﹤0.01).粗毛豚草素(15、30 μmol/L)作用A-549细胞24 h,可使细胞发生G1/S期阻滞.3种浓度(15、30、60 μmol/L)的粗毛豚草素作用24 h,可抑制A-549细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4的表达,使p21蛋白表达增高,但对p27蛋白表达无明显影响.粗毛豚草素(15、30、60 μmol/L)可显著抑制PCNA表达,其表达强度分别为(35.7±2.3)%、(26.6±2.1)%和(14.1±2.2)%,均低于对照组(45.2±3.3)%(P﹤0.01).结论 粗毛豚草素可抑制肺癌细胞A-549增殖,其机制可能与改变细胞周期分布,下调cyclin D1、CDK4表达,上调p21的表达等有关.