关键词：肌,骨骼;葡萄糖转运体4型;细胞,培养的;胰岛素;肌收缩;电脉冲刺激
摘 要：目的 筛选过表达带有HA表位的葡萄糖转运子4(GLUT4HA)且具有收缩能力的C2C12骨骼肌细胞株.方法 建立稳定过表达GLUT4HA的C2C12骨骼肌细胞株,从中挑选出23个克隆.用光镜观察各个克隆分化为多核肌管的能力和响应电脉冲刺激(EPS)的收缩能力,并用免疫印迹法检测各克隆中GLUT4HA蛋白的表达水平,筛选出分化良好、响应EPS收缩且高表达GLUT4HA的细胞株.将各细胞株进一步分为胰岛素组及其对照组、EPS组及其对照组,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组细胞膜上GLUT4HA的含量(转位).结果 在选出的23个克隆中,克隆17的GLUT4HA表达量较高,分化和收缩能力良好,且在胰岛素和EPS后GLUT4转位显著升高.结论 本研究建立了过表达GLUT4HA的具有收缩能力的C2C12-GLUT4HA骨骼肌细胞株,可用于研究胰岛素调节GLUT4转位和收缩调节GLUT4转位的机制.