关键词：鲢鱼卵；半胱氨酸蛋白酶抑制因子；kininogen；纯化；鉴定
摘 要：本文以鲢鱼卵为材料，通过匀浆、酸处理和超滤制备半胱氨酸蛋白酶抑制因子(CPIs)粗提液 。进而经Sephacryl S-100 分子筛层析、Blue Sepharose 6 Fast Flow 染料亲和层析、SP-Sepharose Fast Flow 阳离子交换层析、ConA Sepharose 4B 亲和层析，获得两种纯化的高分子CPIs，即ConA 不吸附部分a-1 和吸附部分的糖蛋白a-2。 二者分别被纯化了102.62 倍和274.28 倍， 收率分别为2 .02 %和1.42 % 。通过TSK G2000 SWXL 凝胶过滤高效液相结合SDS-PAGE 及其反相酶谱法分析，表明a-2 及再次经高效液相回收的a-1 在电泳上均呈单一带，a-2 为单一峰，且a-1 的分子质量为139 ku，a-2 的分子质量为92 ku。二者均能抑制半胱氨酸蛋白酶（木瓜蛋白酶和鲢鱼组织蛋白酶L）但不抑制丝氨酸蛋白酶（胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶）。根据a-1和a-2的分子量及抑制活性特征和糖蛋白特性，推测二者可能为鲢鱼卵kininogens 的不同形式。