花粉管通道法验证花生Oleosi基因启动子的特异性表达
作者单位:青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室,青岛,266109
加工时间:2014-04-15
信息来源:中国粮油学报
关键词:花生;Oleosin基因;特异性表达;花粉管通道法;遗传转化;GUS染色;peanut;Oleosin gene;specific expression;pollen-tube pathway method;GUS staining
摘 要:油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性.研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导入花生.对T0代转基因植株进行了PCR鉴定和GUS组织化学染色,结果显示:50株转基因植株有9株能扩增出目的条带,阳性率为18%,9株阳性转基因植株中有5株的子叶能被GUS染色.对GUS染色成阳性的转基因植株的子叶进行切片观察,结果显示Oleosin基因启动子驱动的GUS基因在油体蛋白中能够表达.