反相高效液相色谱法分离菜籽蛋白水解物及其组分清除自由基能力的研究
关键词:反相高效液相色谱;菜籽蛋白;水解物;自由基;清除
摘 要:采用反相高效液相色谱( RP - HPLC) 技术分离菜籽蛋白的蛋白酶k 水解物( PKH) ,并通过分析其DPPH·、O -2 ·、·OH 的清除能力和氧自由基吸附能力( ORAC) ,评价了PKH 及其分离组分清除自由基的能力。结果表明: 菜籽肽清除DPPH·的能力与其疏水性之间具有显著的正相关性,疏水性最高的组分清除DPPH·的能力与谷胱甘肽( GSH) 相当,IC50值为( 0. 183 8 ± 0. 002 1)mg /mL; 分离后菜籽肽的O -2 ·和·OH 清除能力虽然有所提高,但是仍然弱于GSH; 4 个分离组分的ORAC 值高于PKH,其中2 个组分的ORAC 值与GSH 的相当,1 个组分( F7) 的ORAC 值是GSH的1. 5 倍,其ORAC 值( Trolox) 高达( 2 413. 41 ± 162.98 ) μmol /mg。研究认为,基于疏水性的RP - HPLC 分离显著提高了菜籽肽清除自由基的能力,获得的分离组分( 尤其是F7) 可以作为抗氧剂开发相关功能性食品。