关键词：siRNA;ffh基因;变形链球菌耐氟菌
摘 要：目的筛选鉴定变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因的siRNA干扰序列。方法设计合成4段21bp的核酸[1],利用电穿孔方法转入UA159-FR使其与ffh基因序列靶向位点结合。通过RT-PCR和Real-time PCR技术验证靶向沉默ffh基因的效果,筛选出最佳siRNA干扰序列。结果倒置显微镜观察细菌电转效果正常。转染12h内除siRNA1外其他3对siRNA都可以抑制ffh基因的表达,而在转染超过12h达到24h后,只有siRNA2可以更稳定的抑制ffh基因的表达。结论 siRNA干扰技术可以有效的沉默UA159-FR的ffh基因,siRNA2在沉默过程中效果较稳定。
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