关键词：间质干细胞;流式细胞术;慢病毒属;遗传载体;基因疗法;转染;细胞增殖;mesenchymal stem cells;flow cytometry;lentivirus;genetic vectors;gene therapy;transfection;cell pro-liferation
摘 要：目的探讨含有增强型绿色荧光蛋白标记基因的慢病毒（Lentivirus-EGFP）体外转染人脐带华通胶间充质干细胞(HUWMSCs)的最佳方案及其对细胞增殖活性的影响。方法设计A、B、C、D共4种转染方案，分别以1、10、100的感染复数（MOI）转染体外培养的HUWMSCs，荧光显微镜及流式细胞仪检测各组荧光表达强度及转染效率，MTT法检测细胞增殖倍数。结果转染4 d后所有实验组转染率在10.6%～87.3%，并与MOI值存在量效关系，聚凝胺（5 mg/L）可显著增加病毒转染效率（P＜0.05）。MTT实验结果显示，与对照组比较，不同转染方案细胞增殖存在显著差异（P＜0.001）。A方案MOI=10组及B方案MOI=10组细胞增殖情况较其他组好。结论 B方案MOI=10实验组为最佳转染方案。Lentivirus-EGFP能高效转染HUWMSCs且在2周内稳定表达转染基因，是一种安全、有效的基因转移载体。