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基于芭蕉属EST序列的地涌金莲SSR引物开发
作者:李文娟;马宏;李正红;万友名;刘秀贤;周翠丽 作者单位:中国林业科学研究院资源昆虫研究所,云南昆明650224 加工时间:2014-06-15 信息来源:《林业科学研究》
关键词:地涌金莲;EST-SSR;多态性引物;分子标记
摘 要:对31308条来自NCBI的芭蕉属(Musa)EST序列进行拼接得到全长为13.51 Mb的21 129条无冗余EST序列(含3 818条contigs及17 311条singletons),其中,4 944条(23.40%)EST序列含有5 416条SSRs,SSR的出现频率为25.63%,平均分布距离2.49 Kb,有234条(1.11%)含有1个以上的SSR.在所检测的SSR中,二、三、四核苷酸重复是主导重复类型,分别占EST-SSR总数的21.80%(1 181条)、52.55% (2 846条)和14.55%(788条).AG/CT、AAG/CTT与AGG/CCT和AAAG/CTTT与AAAT/ATTT分别是二、三、四核苷酸的优势重复基元.随机设计了238对EST-SSR引物在24个地涌金莲个体中进行筛选,116对有扩增产物,其中,78对EST-SSR弓物扩增出清晰稳定的目的片段,49对引物表现出多态性.本研究检测的15对引物扩增等位基因数范围是2~7个,平均3.067个;表观杂合度(Ho)范围是0.042~0.750,平均0.250;期望杂合度(He)范围是0.232~0.823,平均0.522.
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