关键词：栉孔扇贝;wnt4 基因;克隆;表达;Chlamys farreri;wnt4 gene;cloning;expression
摘 要：由栉孔扇贝(Chlamys farreri)转录组数据库获得 wnt4基因的一段表达序列标签(EST)序列,利用SMART-RACE 技术克隆了 wnt4基因 cDNA 全长序列,该序列长1239 bp,其中开放阅读框为1068 bp,可以编码355个氨基酸,推导的氨基酸序列含有 WNT 家族特有序列,且与沙蚕(Platynereis dumerilii)、海胆(Heliocidaris erythrogramma)、人(Homo sapiens)等物种 WNT4同源性都在60%以上.半定量 RT-PCR 结果显示,除肾脏外, wnt4基因在栉孔扇贝的精巢、卵巢、闭壳肌、肝胰腺、鳃、外套膜组织中均有表达,但表达量较低.定量 RT-PCR 结果表明: wnt4基因在成熟期的精卵巢中表达量最高,增殖期和休止期表达量次之,生长期表达量最低;整个生殖周期中精巢表达量高于卵巢.该基因在栉孔扇贝多个组织中的表达特性,暗示其参与了多样的生物学过程;在性腺中的表达特征表明其可能参与两性性腺的发育并在生殖细胞成熟过程中发挥作用.