青虾高血糖激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析
作者单位:金舒博,乔慧,吴滟,龚永生,蒋速飞,熊贻伟(中国水产科学研究院 淡水渔业研究中心, 农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室, 江苏 无锡 214081)王宁(南京农业大学 无锡渔业学院, 江苏 无锡 214081)
加工时间:2014-05-15
信息来源:中国水产科学
关键词:青虾;ES型高血糖激素;cDNA;定量PCR;Macrobrachium nipponense;ES-type crustacean hyperglycemic hormone;full-length of cDNA;quantitative PCR
摘 要:本研究首次克隆了青虾(Macrobrachium nipponense)高血糖激素(crustacean hyperglycemic homone, CHH)基因全长cDNA序列,并使用荧光定量PCR技术首次检测了CHH基因在青虾不同组织中的表达.青虾CHH基因cDNA全长1017 bp,包括241 bp的5′UTR,408 bp的开放阅读框(ORF),355 bp的3′UTR,开放阅读框编码135个氨基酸.成熟肽包含6个CHH家族中位置保守的Cys残基.青虾CHH成熟肽C端为GK,确定为ES型CHH基因.蛋白相似度比对显示,所分离的青虾CHH被归为CHH家族I型肽.系统进化树分析表明,青虾CHH多肽与罗氏沼虾聚在一起,具有最近的亲缘关系.荧光定量PCR检测显示, CHH基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量由高到依次为眼柄、精巢、腹神经节、脑、肠、肝、心脏、卵巢.以卵巢为参照其表达量设为1时,眼柄与精巢CHH基因表达量分别为卵巢的500倍和250倍,由此推测CHH基因可能与雄性生殖过程相关.