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木素过氧化物酶的逆胶束纯化研究
作者:郭灵芝;袁兴中;曾光明;崔凯龙;黄华军;方振敏;彭馨;梁运姗 作者单位:湖南大学环境科学与工程学院,湖南长沙410082;湖南大学环境生物与控制教育部重点实验室,湖南长沙410082;湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128 加工时间:2014-04-15 信息来源:《中国环境科学》
关键词:鼠李糖脂;萃取;逆胶束;木素过氧化物酶
摘 要:采用一种新型的逆胶束体系对木素过氧化物酶(LiP)进行了纯化.在此逆胶束体系中,以鼠李糖脂(RL,一种阴离子生物表面活性剂)作为表面活性剂,异辛烷和正己醇分别作为非极性有机溶剂和助表面活性剂(体积比为1∶1),分别考察了RL浓度、振荡时间及水相的离子强度和pH值等因素对LiP的前萃取和后萃取过程的影响.结果表明,在前萃过程中,水相的最佳pH值为3.0,RL和KCl的最适浓度分别为2.75mmol/L和0.04mol/L,振荡时间以30min为最佳(200r/min);在后萃过程中,水相的最佳pH值为6.0,KCl的最适浓度为0.5mol/L.在上述最佳条件下,LiP的酶活回收率(AR)和纯化倍数(PF)分别高达93%,2.9倍.电泳分析结果进一步证实LiP的纯化效果较佳.
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