关键词：茶树；4300 DNA 分析系统；SSR-PCR
摘 要：简单序列重复（Simple sequence repeats, SSR）在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用，基于4300DNA 分析系统的SSR 发掘具有通量高、准确和灵敏等特点，已被用于许多物种的分子标记研究，但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L9(34)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR 的主要参数进行优化，建立了适合于4300 DNA 分析系统的茶树SSR-PCR 反应体系：1.0 μL DNA（25 ng·μL-1），0.2 μLM13F-F、0.2 μL R 和0.4 μL IR-M13F，0.8 μL dNTPs（25 mmol·L-1），1.0 μL 10×Buffer（含Mg2+），0.1 μLEx-Taq 聚合酶（5 U·μL-1），无菌水定容至10 μL。所有引物浓度均为1 μmol·L-1。同时，本研究还证明，可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液（acry∶bis=29∶1）替代4300 DNA 分析系统指定凝胶溶液，检测SSR 位点。