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含串联多拷贝DNA序列的质粒载体的构建
作者单位:天津医科大学附属肿瘤医院乳腺一科、乳腺癌防治教育部重点实验室、天津市“肿瘤防治”重点实验室 300060 加工时间:2014-03-15 信息来源:天津医药
关键词:DNA,重组;克隆,分子;质粒;聚合酶链反应;串联多拷贝DNA序列
摘 要:目的探索简便快速的构建含有串联多拷贝DNA序列的质粒载体的方法。方法通过PCR的方法获得不同拷贝数的DNA序列的片段,以与载体同源重组的方式将PCR片段与载体重组,得到重组质粒。最后经BamHⅠ和NotⅠ双酶切鉴定来确定所构建质粒中插入重复DNA序列的拷贝数。结果经酶切鉴定分析,所得质粒分别可以切出不同大小的片段,而且片段大小与所插入的重复DNA序列拷贝数是相对应的。结论成功构建了含有串联多拷贝DNA序列的质粒载体,为向质粒载体中插入多拷贝DNA序列提供了简便实用的新方法。
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